[发明专利]固相萃取-液相色谱-串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺残留量的方法

说明书

本发明提供固相萃取‑液相色谱‑串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺残留量的方法，属于食品检测技术领域。固相萃取前进行样品的提取是称取处理好的待测试样，置于塑料离心管中，加入乙酸水和二氯甲烷，振荡提取，再离心得上清液；净化是活化平衡固相萃取柱，取上清液过固相萃取柱，先后加入水和甲醇林洗小柱，再用甲酸乙腈洗脱并收集至塑料离心管中；氮气吹至近干，加入甲酸水定容，供仪器分析；再采用液相色谱仪对化合物进一步分离，采用质谱仪对分离后的检测液进行定性分析和定量分析。该方法适用于沃柑、菠萝蜜、生菜、黄瓜、糙米、杏仁、茶叶等植物源性食品中双胍辛胺的残留量检测和定量，具有快速、准确、灵敏、且毒性低的特点。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，具体涉及固相萃取-液相色谱-串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺及其双胍盐(包括双胍三辛烷基苯磺酸盐和双胍三辛乙酸盐)残留量的方法。

背景技术

双胍辛胺是一种广谱性杀真菌剂，具有触杀和预防作用，对大多数由子囊菌和半知菌引起的真菌病害有良好的效果。双胍三辛烷基苯磺酸盐(Iminoctadine tris(albesilate))和双胍三辛乙酸盐(Iminoctadine triacetate)均是其最常见的盐类杀菌剂，广泛应用于柑橘、苹果、番茄、生菜等水果蔬菜的病害防治和防腐保鲜。双胍辛胺属于中等毒性农药，对水生生物有极高毒性，若因大量使用而释放至环境中可能对环境和人体产生不良影响。因此，各国均制定了双胍辛胺的残留限量标准，国家标准GB 2763-2019规定了双胍三辛烷基苯磺酸盐在水果蔬菜中的最大残留限量为0.2～3mg/kg，欧盟规定双胍辛胺在柑橘水果中的残留量不能超过0.05mg/kg，日本规定水中双胍三辛乙酸盐不能超过6μg/L。然而，由于双胍辛胺极性较强，稳定性较差，并且容易受样品基质及各种实验材料器具的吸附和干扰，导致双胍辛胺检测较为困难。目前，国际上常采用液相色谱-柱后衍生荧光检测法，该方法操作复杂、灵敏度低、重现性差，难以满足双胍辛胺的痕量检测和定量要求。

公开号为CN103983723B的中国发明公开了一种水果蔬菜中双胍辛胺残留量检测方法，是将样品采用化学试剂提取、羧甲基甲硅烷基化硅胶小柱净化得到试验溶液，使用液相色谱串联质谱联用仪进行检测。该方法需要大量样品(100g)；需要经过预处理、重复提取、液液萃取、减压浓缩等复杂的提取步骤，而且需要用到大量的盐酸胍、三乙胺、正丁醇、正己烷、硫酸盐等易燃、易爆、有毒、有害的危险化学品试剂；同时质谱方法采集的是双胍辛胺较不稳定且响应较差的单电荷母离子及其子离子。因此，该方法在实践中检测步骤复杂、消耗大量危险化学品而且检测的灵敏度和重现性较差，并不适合推广使用，本领域技术人员还需要研究出一种不仅经济、环保，而且简单、快速、准确、灵敏的检测方法。

发明内容

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，本发明提供固相萃取-液相色谱-串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺残留量的方法，适用于水果、蔬菜、粮谷、坚果和茶叶等植物源性食品中双胍辛胺、双胍三辛乙酸盐和双胍三辛烷基苯磺酸盐的残留量检测和定量，该方法具有简单、快速、准确、灵敏、且毒性低的特点。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

固相萃取-液相色谱-串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺残留量的方法，包括以下步骤：

(1)样品处理

样品准备：取植物源食品试样，除去非可食部分的果皮或壳后，用均质器或研磨仪将试样绞碎研磨成均匀细碎的试样，备用；所述植物源食品试样包括但不限于水果、蔬菜、粮谷、坚果和茶叶；

提取：称取适量处理好的试样，置于塑料离心管中，加入弱酸性水溶液和二氯甲烷，振荡提取，再进行离心处理，得上清液备用；

净化：活化平衡WCX固相萃取柱，取部分上清液通过所述固相萃取柱；先后加入水和甲醇林洗小柱；再用10Vol％甲酸乙腈洗脱并收集至塑料离心管中；氮气吹至近干，加入0.2Vol％甲酸水定容至1mL，涡旋混匀，过0.22μm针式滤器，装入塑料进样瓶，供后续仪器分析；