[发明专利]一种左旋多巴的高灵敏荧光检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202110703793.3 | 申请日: | 2021-08-24 |
公开(公告)号: | CN113514438A | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
发明(设计)人: | 刘玉菲;安佳;张国秀;史彧霞;崔洪源;杨达 | 申请(专利权)人: | 重庆大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400044 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 左旋多巴 灵敏 荧光 检测 方法 试剂盒 | ||
本发明公开了一种左旋多巴的高灵敏荧光检测方法,包括以下步骤:S1:将乙二胺添加至缓冲液中,获得第一混合液;S2:在所述第一混合液中,加入左旋多巴溶液得到第二混合液;S3:加热使所述第二混合液反应后得到第三混合液;S4:通过光谱仪收集所述第三混合液在360nm处的发射峰强度,并通过发射峰强度计算左旋多巴的浓度。另一方面,本发明还提出一种用于左旋多巴的高灵敏荧光检测的试剂盒:包括缓冲液、乙二胺,所述试剂盒通过所述左旋多巴的高灵敏荧光检测方法实现对左旋多巴的检测。
技术领域
本申请涉及化学检测领域,尤其涉及一种左旋多巴的高灵敏荧光检测方法及试剂盒。
背景技术
左旋多巴(L-DOPA)是多巴胺的代谢前体,在帕金森病(PD)患者的治疗中发挥重要作用。监测左旋多巴血药浓度可用于评价交感神经系统状态,是PD治疗的重要指标。例如,监测左旋多巴的血药浓度有助于评估患者用药剂量的适宜性和避免用药过量。由于左旋多巴检测的高度重要性,到目前为止已经开发了许多用于测定左旋多巴浓度的分析方法,包括分光光度法、电化学、高效液相色谱(HPLC)、毛细管电泳、液相色谱/质谱(LC/MS)方法。然而,上面提到的一些方法是昂贵的,需要复杂的仪器,同时他们的分析通常是耗时的。此外,一些检测程序面临需要解决的选择性问题。例如,抗坏血酸(AA)和尿酸(UA)可能会对电化学方法测定左旋多巴造成严重干扰。因此,迫切需要开发能够同时检测左旋多巴的简单、选择性和灵敏的方法。
发明内容
基于以上问题,本发明提出了一种左旋多巴的高灵敏荧光检测方法,包括以下步骤:
S1:将乙二胺添加至缓冲液中,获得第一混合液;
S2:在所述第一混合液中,加入左旋多巴溶液得到第二混合液;
S3:加热使所述第二混合液反应后得到第三混合液;
S4:通过光谱仪收集所述第三混合液在360nm处的发射峰强度,并通过发射峰强度计算左旋多巴的浓度。
在其中一个实施例中,所述缓冲液选自伯瑞坦-罗宾森、磷酸盐缓冲溶液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中的任意一种,所述缓冲液的pH值为7.0~12.0。
在其中一个实施例中,所述第一混合液中乙二胺的浓度为1M-1.5M。
在其中一个实施例中,步骤S3的加热温度为30℃-60℃。
在其中一个实施例中,步骤S3的加热时间不小于8分钟。
在其中一个实施例中,形成所述第一混合液之前,还包括步骤S1a:向所述缓冲液中加入参比物。
在其中一个实施例中,所述参比物为荧光金纳米团簇、荧光碳量子点、荧光硅量子点、荧光CdTe量子点中的至少一种,所述参比物在紫外光照下显红色。
在其中一个实施例中,所述参比物在反应体系中的浓度为0.01mg/mL-1mg/mL。
这种检测方法简单高效,仅通过乙二胺在特定pH值缓冲液中形成的混合液即可实现对左旋多巴的快速、高灵敏检测,成本低,效率高,具有广阔的应用前景。
另一方面,本发明还提出一种用于左旋多巴的高灵敏荧光检测的试剂盒:包括:缓冲液、乙二胺,所述试剂盒通过权利要求1所述的左旋多巴的高灵敏荧光检测方法实现对左旋多巴的检测。
在其中一个实施例中,还包括参比物,所述参比物为荧光金纳米团簇、荧光碳量子点、荧光硅量子点、荧光CdTe量子点中的至少一种,所述参比物在紫外光照下显红色。
这种试剂盒仅通过乙二胺和缓冲液,再结合常用的光谱仪设备,即可实现对左旋多巴的快速、高灵敏检测,成本低,效率高,具有广阔的应用前景。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明:
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