[发明专利]一种头花蓼提取物对喹诺酮类药物吸收作用的测定方法

说明书

本发明公开了一种头花蓼提取物对喹诺酮类药物吸收作用的测定方法，该方法包括如下步骤：建立Caco‑2细胞体外吸收模型，设立头花蓼提取物组、喹诺酮类药物组、头花蓼提取物与喹诺酮类药物合用组，利用BCA试剂盒技术和UPLC‑MS/MS法考察头花蓼提取物中两个指标性成分没食子酸、原儿茶酸与喹诺酮类药物单用和合用时的摄取量差异。通过本发明的方法可以考查头花蓼提取物与左氧氟沙星联用后两药在Caco‑2细胞模型中吸收的影响，从而为两药在临床上使用提供参考价值。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其一种头花蓼提取物对喹诺酮类药物吸收作用的测定方法。

背景技术

抗菌药物，对革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均具有光谱活性，临床上主要用于治疗呼吸道和泌尿道感染。头花蓼为苗族传统药用植物头花蓼的全草，具有利尿通淋、清热利湿、活血散瘀等功效，传统医学认为该药用植物治疗尿路感染具有较好的治疗效果，其多酚化学成分没食子酸和原儿茶酸经现代药理学研究表明具有抗氧化、抗菌和抗炎等作用。

在现有技术中，公开号为CN102526218A的发明专利公开了一种制备头花蓼提取物的方法和头花蓼提取物，其基本上包括以下步骤：(1)将头花蓼地上部分鲜品或干品加水煎煮，过滤，使滤液浓缩、干燥；(2)将步骤(1)所得干燥物用76～84％乙醇提取，过滤，使滤液浓缩、干燥，即得。该方案得到的头花蓼提取物可用于制备清热利湿用药，利尿通淋用药，泌尿系统感染或结石用药，肾盂肾炎用药，解毒、散瘀用药，抗菌、抗炎、镇痛用药，前列腺炎用药。公开号为CN103550309A的发明专利公开了一种头花蓼降糖提取物颗粒剂的制备方法，其包括以下工艺步骤：1)头花蓼降糖提取物提取；2)配料；3)制粒和装袋。该方案通过对头花蓼醇提后水提后得到的混合药液经过合理的参数、步骤控制制成颗粒剂。公开号为CN105326913A的发明专利提供了头花蓼提取物及其在降血糖药物中的应用，头花蓼提取物的制备方法是：头花蓼全草药材干燥切段，含水低级醇溶液浸泡后，再用含水低级醇溶液渗漉提取，提取液浓缩干燥后，得头花蓼总提物；取此头花蓼总提物，加蒸馏水混悬后，依次分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行分步萃取，其中正丁醇萃取相回收溶剂至无醇味后，加适量蒸馏水溶解并进行离心，离心后的上清液进行聚苯乙烯多孔性吸附大孔树脂柱色谱，先以蒸馏水水淋除去杂质，再用含水低级醇溶液洗脱，洗脱液浓缩干燥后，即得头花蓼提取物。动物实验证实：上述头花蓼提取物通过促进胰岛素分泌、抗氧化以及调节脂质代谢紊乱等作用，对糖尿病大鼠具有显著的降血糖作用。

目前，以头花蓼为原料药已开发上市了四季草颗粒、热淋清颗粒等苗药制剂，其中热淋清颗粒是以头花蓼经水提取后制成的单方制剂，对泌尿系统感染具有独特疗效。据报道，热淋清颗粒常与喹诺酮类抗生素合用治疗泌尿道感染，特别是与左氧氟沙星联用，用于前列腺炎、急性附睾炎等泌尿道感染疾病，与单独使用相比，联用后具有起效快、不良反应少、用药周期短、治愈率高等优点，但两药联用后是否发生药物相互作用未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种头花蓼提取物对喹诺酮类药物吸收作用的测定方法，以考查头花蓼提取物与左氧氟沙星联用后两药在Caco-2细胞模型中吸收的影响，从而为两药在临床上使用提供参考价值。

为实现本发明的上述目的，本发明的技术方案：

一种头花蓼提取物对喹诺酮类药物吸收作用的测定方法，该方法包括如下步骤：建立Caco-2细胞体外吸收模型，设立头花蓼提取物组、喹诺酮类药物组、头花蓼提取物与喹诺酮类药物合用组，利用BCA试剂盒技术和UPLC-MS/MS法考察头花蓼提取物中两个指标性成分没食子酸、原儿茶酸与喹诺酮类药物单用和合用时的摄取量差异。其中，前述的喹诺酮类药物为左氧氟沙星。

其中，Caco-2细胞体外吸收模型的建立包括Caco-2细胞的培养及形态变化和细胞摄取过程；其中，Caco-2细胞的培养及形态变化包括如下步骤：选取Caco-2细胞，将其接种于高糖DMEM培养基的培养液中，置于培养箱中培养；待细胞生长至预定状态，采用胰蛋白酶消化液消化细胞接种于培养板，一周内隔天换1次培养液，1周后每天换液1次，细胞培养至细胞单层膜形成。