[发明专利]7种耐药基因多重PCR检测的引物、探针及其试剂盒

权利要求书

1.7种耐药基因多重PCR检测的引物、探针组，其特征在于，包括：

用于检测KPC基因的SEQ ID NO：1～2所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：3所示核苷酸序列的探针；

用于检测NDM基因的SEQ ID NO：4～5所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：6所示核苷酸序列的探针；

用于检测IMP基因的SEQ ID NO：7～8所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：9所示核苷酸序列的探针；

用于检测VIM基因的SEQ ID NO：10～11所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：12所示核苷酸序列的探针；

用于检测OXA48基因的SEQ ID NO：13～14所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：15所示核苷酸序列的探针；

用于检测mecA基因的SEQ ID NO：16～17所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：18所示核苷酸序列的探针；和

用于检测vanA基因的引SEQ ID NO：19～20所示核苷酸序列的引物和SEQ ID NO：21所示核苷酸序列的探针。

2.权利要求1所述的引物、探针组在制备CRE、MRSA和VRE中7种耐药基因多重检测的试剂盒中的应用。

3.7种耐药基因多重检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物、探针组。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括检测试剂和核酸提取试剂。

5.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述检测试剂包括无菌水、PCRMix。

6.7种耐药基因的多重PCR检测的方法，其特征在于，利用权利要求1所述的引物探针组或权利要求3或4所述的试剂盒进行检测。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，基于多重荧光PCR或多重数字PCR平台进行检测。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，基于多重数字PCR平台的检测方法包括以下步骤：

(1)提取待测样本核酸；

(2)配置数字PCR反应液；

(3)制备液滴芯片；

(4)运行液滴芯片扩增程序后，采用生物芯片阅读仪进行分析后报告输出。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测样本为感染患者血浆样本或无症状定植者肛肠试子样本。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述扩增程序包括：95℃预变性5min；95℃变性15秒，60℃退火30秒，循环40次。