[发明专利]一种高比例B7H4阳性脐带间充质干细胞、其培养方法及培养液

权利要求书

1.一种脐带间充质干细胞，其特征在于：所述脐带间充质干细胞表面表达B7H4分子的比例大于等于45%；

它通过如下方法培养得到：

（1）接种并培养脐带间充质干细胞；

（2）使用同时含有IL-6和IL-6R α的刺激培养液培养所述脐带间充质干细胞；

（3）消化步骤（2）得到的脐带间充质干细胞，吹打，终止消化，即得；

所述刺激培养液中，IL-6的终浓度为1-10 ng/mL，IL-6R α的终浓度为1-10 ng/mL ，IL-6和IL-6R α的用量摩尔比为1:1。

2.按照权利要求1所述的脐带间充质干细胞，其特征在于：所述脐带间充质干细胞表面表达B7H4分子的比例为45-61.8%。

3.按照权利要求1所述的脐带间充质干细胞，其特征在于：所述脐带间充质干细胞表面表达PD-L1分子的比例大于等于40%。

4.按照权利要求3所述的脐带间充质干细胞，其特征在于：所述脐带间充质干细胞表面表达PD-L1分子的比例为40-51.5%。

5.权利要求1-4任一项所述的脐带间充质干细胞的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）接种并培养脐带间充质干细胞；

（2）使用同时含有IL-6和IL-6R α的刺激培养液培养所述脐带间充质干细胞；

（3）消化步骤（2）得到的脐带间充质干细胞，吹打，终止消化，即得；

所述刺激培养液中，IL-6的终浓度为1-10 ng/mL，IL-6R α的终浓度为1-10 ng/mL ，IL-6和IL-6R α的用量摩尔比为1:1。

6.按照权利要求5所述培养方法，其特征在于：步骤（1）中，接种密度为10000-20000细胞/cm²；和/或，所述培养的条件为在37℃，体积分数5% CO₂浓度下培养24小时；

和/或，步骤（1）所用培养液是以L-DMEM培养液作为基础培养基，添加有终浓度为：

10% v/v的FBS胎牛血清；

5mmol/L的谷氨酰胺；

100 U/mL的青霉素；

100 μg/mL的链霉素。

7.按照权利要求5所述培养方法，其特征在于：步骤（2）中，所述培养的条件为在37℃，体积分数5% CO₂浓度下培养48小时；

和/或，步骤（2）所用刺激培养液是以L-DMEM培养液作为基础培养基，添加有终浓度为：

10% v/v的FBS胎牛血清；

1-10 ng/mL的IL-6；

1-10 ng/mL的IL-6R α；

5mmol/L的谷氨酰胺；

100 U/mL的青霉素；

100 μg/mL的链霉素。

8.一种用于培养权利要求1-4任一项所述的脐带间充质干细胞的培养液，其特征在于，它是以L-DMEM培养液作为基础培养基，添加有终浓度为：

10% v/v的FBS胎牛血清；

1-10 ng/mL的IL-6；

1-10 ng/mL的IL-6R α；

5mmol/L的谷氨酰胺；

100 U/mL的青霉素；

100 μg/mL的链霉素；

所述IL-6和IL-6R α的用量摩尔比为1:1。

9.IL-6和IL-6R α在培养权利要求1-4任一项所述的脐带间充质干细胞，或在制备用于培养权利要求1-4任一项所述的脐带间充质干细胞的培养液中的用途，其特征在于：在用于培养所述脐带间充质干细胞的培养液中，IL-6的终浓度为1-10 ng/mL，IL-6R α的终浓度为1-10 ng/mL ，IL-6和IL-6R α的用量摩尔比为1:1。