[发明专利]一种椰枣组培中抑制内生菌及材料褐化的培养基及应用

权利要求书

1.一种椰枣组培中抑制内生菌及材料褐化的培养基，其特征在于，包括试剂A、试剂B和试剂C；

所述试剂A为含山农一号Ⅰ型杀菌剂的1/2MS盐溶液；

所述试剂B为含山农一号Ⅲ型杀菌剂、植物凝胶、蔗糖、谷氨酰胺、盐酸吡哆醇、烟酸、6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、噻苯隆、萘乙酸、聚乙烯吡咯烷酮、乙烷磺酸一水和活性炭的MS盐溶液；

所述试剂C为含植物凝胶、蔗糖、谷氨酰胺、盐酸吡哆醇、烟酸、肌醇、6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、聚乙烯吡咯烷酮、乙烷磺酸一水和活性炭的MS盐溶液；

且，试剂A中所述山农一号Ⅰ型杀菌剂终浓度为1-5％wt；

试剂B中所述山农一号Ⅲ型杀菌剂终浓度为0.1-0.2％wt，所述植物凝胶终浓度3.5g/L，所述蔗糖终浓度30g/L，所述谷氨酰胺终浓度100mg/L，所述盐酸吡哆醇终浓度1mg/L，所述烟酸终浓度0.5mg/L，所述6-苄氨基腺嘌呤终浓度0.2-0.8mg/L，所述异戊烯基腺嘌呤终浓度0.1-0.5mg/L，所述2,4-二氯苯氧乙酸终浓度0.02-0.08mg/L，所述噻苯隆终浓度0.02-0.08mg/L，所述萘乙酸终浓度0.08-0.12mg/L，所述聚乙烯吡咯烷酮终浓度0.5-1g/L，所述乙烷磺酸一水终浓度1g/L，所述活性炭终浓度0.25-1g/L；

试剂C中所述植物凝胶终浓度3.5g/L，所述蔗糖终浓度30g/L，所述谷氨酰胺终浓度200mg/L，所述盐酸吡哆醇终浓度0.3mg/L，所述烟酸终浓度0.5mg/L，所述肌醇终浓度100mg/L，所述6-苄氨基腺嘌呤终浓度1-4mg/L，所述异戊烯基腺嘌呤终浓度1-3mg/L，所述2,4-二氯苯氧乙酸终浓度2-6mg/L，所述萘乙酸终浓度3-6mg/L，所述聚乙烯吡咯烷酮终浓度0.5-1g/L，所述乙烷磺酸一水终浓度1g/L，所述活性炭终浓度0.5-1g/L。

2.根据权利要求1所述的椰枣组培中抑制内生菌及材料褐化的培养基，其特征在于，

试剂A中所述山农一号Ⅰ型杀菌剂终浓度为4.5％wt；

试剂B中所述山农一号Ⅲ型杀菌剂终浓度为0.12％wt，所述6-苄氨基腺嘌呤终浓度0.5mg/L，所述异戊烯基腺嘌呤终浓度0.2mg/L，所述2,4-二氯苯氧乙酸终浓度0.05mg/L，所述噻苯隆终浓度0.05mg/L，所述萘乙酸终浓度0.1mg/L，所述聚乙烯吡咯烷酮终浓度0.5g/L，所述活性炭终浓度0.5g/L；

试剂C中所述6-苄氨基腺嘌呤终浓度2mg/L，所述异戊烯基腺嘌呤终浓度1.5mg/L，所述2,4-二氯苯氧乙酸终浓度4mg/L，所述萘乙酸终浓度5mg/L，所述聚乙烯吡咯烷酮终浓度1g/L，所述活性炭终浓度1g/L。

3.一种椰枣组培中抑制内生菌及材料褐化的培养基的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)按权利要求 1或2所述椰枣组培中抑制内生菌及材料褐化的培养基的配比称取各原料；

(2)用无菌水溶解1/2MS盐，加入山农一号Ⅰ型杀菌剂，无菌水定容，灭菌，得试剂A；

(3)分别使用0.8-1.2mol/L的氢氧化钠溶液将6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、噻苯隆和萘乙酸分别溶解，备用；

用无菌水溶解MS盐，加热搅拌，然后加入蔗糖、谷氨酰胺、盐酸吡哆醇、烟酸、聚乙烯吡咯烷酮和乙烷磺酸一水，以及溶解后的6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、噻苯隆和萘乙酸，搅拌均匀，调节pH，再加入植物凝胶和活性炭，加热搅拌，再加入山农一号Ⅲ型杀菌剂，无菌水定容，灭菌，得试剂B；

(4)分别使用0.8-1.2mol/L的氢氧化钠溶液将6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸和萘乙酸分别溶解，备用；

用无菌水溶解MS盐，加热搅拌，然后加入蔗糖、谷氨酰胺、盐酸吡哆醇、烟酸、肌醇、聚乙烯吡咯烷酮和乙烷磺酸一水，以及溶解后的6-苄氨基腺嘌呤、异戊烯基腺嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸和萘乙酸，搅拌均匀，调节pH，再加入植物凝胶和活性炭，加热搅拌，无菌水定容，灭菌，得试剂C。