[发明专利]硫代磷修饰适配子、硫代磷修饰适配子偶联T细胞及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种硫代磷修饰适配子，其特征在于，所述硫代磷修饰适配子为将适配子的5’端末端四个核苷酸间的3个磷酸二酯键进行硫代磷酸化修饰而获得。

2.根据权利要求1所述的一种硫代磷修饰适配子，其特征在于，所述硫代磷修饰适配子包括硫代磷修饰的PDL1适配子，其中所述PDL1适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的一种硫代磷修饰适配子，其特征在于，所述硫代磷修饰适配子还包括：在所述适配子的核苷酸序列上结合生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、聚乙二醇和叶酸标记中的至少一种。

4.一种硫代磷修饰适配子偶联T细胞，其特征在于，所述硫代磷修饰适配子偶联T细胞为：将权利要求1所述的硫代磷修饰适配子经DBCO修饰后与表面携带有叠氮基的激活T细胞偶联获得。

5.一种硫代磷修饰适配子偶联T细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

将权利要求1所述的硫代磷修饰适配子采用DBCO进行修饰，获得DBCO-硫代磷修饰的适配子；

通过糖代谢途径在CD3⁺T细胞表面表达叠氮键，获得表面携带有叠氮基的激活T细胞；

将所述DBCO-硫代磷修饰的适配子与所述表面携带有叠氮基的激活T细胞进行偶联，获得硫代磷修饰适配子偶联T细胞。

6.根据权利要求5所述的一种硫代磷修饰适配子偶联T细胞的制备方法，其特征在于，所述将权利要求1所述的硫代磷修饰适配子采用DBCO进行修饰，获得DBCO-硫代磷修饰的适配子，包括：

采用硫代磷酸化引物对适配子5’端末端四个核苷酸间的3个磷酸二酯键进行硫代磷酸化修饰，获得硫代磷修饰适配子；

将所述硫代磷修饰适配子采用DBCO进行修饰，获得DBCO-硫代磷修饰的适配子。

7.根据权利要求5所述的一种硫代磷修饰适配子偶联T细胞的制备方法，其特征在于，所述通过糖代谢途径在CD3⁺T细胞表面表达叠氮键，获得表面携带有叠氮基的激活T细胞，包括：

通过磁珠分选获得CD3⁺T细胞；

将anti-CD3、anti-CD28和白细胞介素-2与所述CD3⁺T细胞进行共培养，获得体外激活CD3⁺T细胞；

将所述体外激活CD3⁺T细胞与叠氮修饰的甘露糖胺共培养，以使得在CD3⁺T细胞表面表达叠氮基，获得表面携带有叠氮基的激活T细胞。

8.根据权利要求5所述的一种硫代磷修饰适配子偶联T细胞的制备方法，其特征在于，所述将所述DBCO-硫代磷修饰的适配子与所述表面携带有叠氮基的激活T细胞进行偶联，获得硫代磷修饰适配子偶联T细胞，包括：

将所述DBCO-硫代磷修饰的适配子与所述表面携带有叠氮基的激活T细胞进行共培养，获得硫代磷修饰适配子偶联T细胞。

9.一种权利要求1-3任一所述的硫代磷修饰适配子和/或权利要求4所述的硫代磷修饰适配子偶联T细胞在制备肿瘤诊断药物或抗肿瘤药物中的应用。

10.一种抗病毒的药物，其特征在于，所述药物的活性成分包括如权利要求4所述的硫代磷修饰适配子偶联T细胞。