[发明专利]一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法有效
申请号: | 202110724091.3 | 申请日: | 2021-06-29 |
公开(公告)号: | CN113433103B | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
发明(设计)人: | 王鹏;王冬伟;周志强;刘东晖 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京成高专利代理事务所(普通合伙) 16047 | 代理人: | 姚燕春 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 氯苯 乙酸 方法 | ||
1.一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法,其特征在于,步骤如下:
1)将碱性磷酸酶溶液与样品混合、静置,得到静置液;
2)将所述步骤1)得到的静置液与焦磷酸钠溶液、Tris-HCl缓冲液混合后进行反应,得到反应液;
3)将所述步骤2)得到的反应液与硝酸铈溶液混合、振荡,得到振荡液,测定所述振荡液的荧光发射光谱,得到最大荧光强度,将所述最大荧光强度转化为酶抑制率;
所述酶抑制率=(FD-F0)/(F-F0)×100,FD代表存在2,4-二氯苯氧乙酸时,荧光发射光谱中的最大荧光强度,F0代表不存在2,4-二氯苯氧乙酸时,荧光发射光谱中的最大荧光强度,F代表荧光发射光谱中的最大荧光强度;
4)将所述步骤3)得到的酶抑制率代入线性方程,得到样品中2,4-二氯苯氧乙酸的浓度;
所述线性方程为:酶抑制率=37.22×log10c-3.2,c的单位为μg/L;
所述步骤1)碱性磷酸酶溶液与样品的体积比为1:5,所述碱性磷酸酶溶液的浓度为100U/mL;
所述步骤2)焦磷酸钠溶液与Tris-HCl缓冲液、碱性磷酸酶溶液的体积比为2:4:1;所述焦磷酸钠溶液的浓度为1mM;所述Tris-HCl缓冲液的浓度为50mM,pH值为8.0;
所述步骤3)硝酸铈溶液与碱性磷酸酶溶液的体积比为4:1,所述硝酸铈溶液的浓度为0.5mM。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)静置的条件包括:静置的时间为15min,静置的环境温度为37℃。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)反应的条件包括:反应的环境温度为37℃,反应的时间为25min。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)振荡的条件包括:振荡的转速为500rpm,振荡的时间为5min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)测定振荡液的荧光发射光谱的荧光激发波长为300nm。
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