[发明专利]一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法

说明书

本发明提供了一种检测2,4‑二氯苯氧乙酸的方法，属于农药检测技术领域，包括将碱性磷酸酶溶液与样品混合、静置，得到静置液；将静置液与焦磷酸钠溶液、Tris‑HCl缓冲液混合后进行反应，得到反应液；将反应液与硝酸铈溶液混合、振荡，得到振荡液，测定所述振荡液的荧光发射光谱，得到最大荧光强度，将所述最大荧光强度转化为酶抑制率；将酶抑制率代入线性方程，得到样品中2,4‑二氯苯氧乙酸的浓度。采用本发明提供的方法不需制备检测探针，45min就能得到检测结果；线性方程的线性范围为2.5～200μg/L，检测限为0.98μg/L。

技术领域

本发明属于农药检测技术领域，尤其涉及一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法。

背景技术

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)是一种多用途农用化学品，可用作植物生长调节剂或除草剂。2,4-D的生物活性随浓度高低有所不同：低浓度时2,4-D具有类似于植物内源生长素吲哚乙酸的活性，可促进植物生长，还可防止落果；而高浓度时2,4-D对阔叶杂草具有灭活作用。2,4-D具有价格低廉，施药量较少等优点，广泛应用于农业生产。2,4-D虽然被分类为低毒农药(大鼠急性经口半数致死量：639～764mg/kg)，但研究发现2,4-D可能具有多种毒性效应，包括致癌性、神经毒性、生殖毒性等。2,4-D的衍生物2,4-滴丁酯，因具有“2,4-滴丁酯易挥发，使用时容易造成登记作物和邻近作物药害事故；对水生生物急性毒性为高毒，慢性毒性表现为存活率、生殖能力下降。

目前，检测农产品中2,4-D残留的标准方法为色谱法，包括气相色谱法、液相色谱法、色谱-质谱联用法等。而2,4-D可抑制ALP活性，已有多种基于ALP的生物传感器用于检测2,4-D。然而，已有的生物传感器需要进行耗时较长的准备过程，例如电极制备或检测探针合成，这一过程往往较为繁琐且耗时，与农药残留快速检测的需求较不匹配。因此，开发更加简单快捷的检测技术，可推动ALP在2,4-D快速检测领域的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法，采用本发明提供的方法能够简单快速的检测样品中2,4-二氯苯氧乙酸的含量。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法，包括以下步骤：

1)将碱性磷酸酶溶液与样品混合、静置，得到静置液；

2)将所述步骤1)得到的静置液与焦磷酸钠溶液、Tris-HCl缓冲液混合后进行反应，得到反应液；

3)将所述步骤2)得到的反应液与硝酸铈溶液混合、振荡，得到振荡液，测定所述振荡液的荧光发射光谱，得到最大荧光强度，将所述最大荧光强度转化为酶抑制率；

所述酶抑制率＝(FD-F0)/(F-F0)×100，FD代表存在2,4-二氯苯氧乙酸时，荧光发射光谱中的最大荧光强度，F0代表不存在2,4-二氯苯氧乙酸时，荧光发射光谱中的最大荧光强度，F代表荧光发射光谱中的最大荧光强度；

4)将所述步骤3)得到的酶抑制率代入线性方程，得到样品中2,4-二氯苯氧乙酸的浓度；

所述线性方程为：酶抑制率＝37.22×log₁₀c-3.2，c的单位为μg/L。

优选的，所述步骤1)碱性磷酸酶溶液与样品的体积比为1:5。

优选的，所述碱性磷酸酶溶液的浓度为100U/mL。

优选的，所述步骤1)静置的条件包括：静置的时间为15min，静置的环境温度为37℃。

优选的，所述步骤2)焦磷酸钠溶液与Tris-HCl缓冲液、碱性磷酸酶溶液的体积比为2:4:1；

所述焦磷酸钠溶液的浓度为1mM；