[发明专利]一种腺苷参与的NMN半合成方法有效
申请号: | 202110728702.1 | 申请日: | 2021-06-29 |
公开(公告)号: | CN113481262B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 金彩科;赵媛 | 申请(专利权)人: | 康盈红莓(中山)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/30 | 分类号: | C12P19/30;C12P19/32;C12R1/84;C12R1/865 |
代理公司: | 广东法仁律师事务所 44870 | 代理人: | 杜玮 |
地址: | 528400 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 腺苷 参与 nmn 合成 方法 | ||
1.一种腺苷参与的NMN半合成方法,其特征在于,包括同一反应体系下加入腺苷、磷酸盐、可被酵母细胞代谢的糖类、酵母细胞、NR和NRK进行一锅化反应以完成以下步骤:
(A)腺苷、磷酸盐以及可被酵母细胞代谢的糖类在酵母细胞的催化作用下反应生成ATP的步骤;和
(B)NR的酶促磷酸化步骤,对应NR和ATP在NRK的催化作用下反应生成NMN和ADP的步骤,其中生成的ADP在所述同一反应体系下自动用于所述步骤(A)以生成ATP,以同时执行利用酵母细胞依能量代谢发酵反应生成ATP以及利用ATP使NR磷酸化的两个步骤,其中酵母细胞是进行氧化磷酸化代谢的酵母细胞并被保持在所述同一反应体系中,以在酶促磷酸化步骤结束后将所述同一反应体系中生成的磷酸盐产物通过能量代谢的方式去除。
2.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,NR原料选自商用的NR纯品、商用的NRC纯品、含有NR的固体、含有NRC的固体、含有NR的液体以及含有NRC的液体中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,可被酵母细胞代谢的糖类选自葡萄糖、蔗糖、淀粉以及甘油中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,NRK酶以液酶形态和固定化酶形态中的至少一种原始形态存在。
5.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,酵母细胞选自毕赤酵母和酿酒酵母中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,进一步添加有金属离子。
7.根据权利要求6所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,添加的金属离子选自镁离子和锰离子中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,腺苷与NR的摩尔比范围是0.01~1。
9.根据权利要求8所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,NR与磷酸盐的摩尔比范围是1~20。
10.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,酵母细胞是冰冻储存过的湿酵母。
11.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中在所述的腺苷参与的NMN半合成方法的反应体系中,进一步添加有甲苯、正丁醇中以及吐温20中的至少一种有机试剂。
12.根据权利要求1所述的腺苷参与的NMN半合成方法,其中所述步骤(A)在所述步骤(B)之前被启动,以为所述步骤(B)的反应提供ATP而形成所述步骤(A)和所述步骤(B)在同一反应体系中相互促进的反应状态。
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