[发明专利]一种高品质的青贮构树发酵方法

说明书

本发明公开了一种高品质的青贮构树发酵方法，包括有选定青贮原料、设置对照组CK和对比组P97、P94和P91、MRS培养基的准备、菌种接种培养、使用钙圈溶法对菌种分离纯化和性能检测六步骤。本发明通过设置有对照组CK和对比组P97、P94和P91，可在添加不同浓度的玉米淀粉情况下，对构树青贮过程中存在的微生物种类、以及乳酸菌发酵的比例和内部微生物对乳酸菌发酵的干扰等方面均进行检测，添加6％浓度的玉米淀粉，可得到较高比例的乳酸菌，且可获得较高比例的糖乳杆菌，进而获得纯度较高的乳酸菌，提高构树青贮质量和效率。

技术领域

本发明涉及乳酸菌分离筛选装置及方法技术领域，具体为一种高品质的青贮构树发酵方法。

背景技术

构树,分布在我国大江南北，是东亚地区常见树种,且构树生长迅速、适应性强，在平原、丘陵、荒滩等各类地貌下均可成长，经研究表明,构树体内含有多种黄酮类化合物，具有抗菌抗炎、增强免疫力的作用，为构树的饲用化、药用化提供了理论基础，而传统野生构树存在树叶密生柔毛、适口性差等缺陷，通过青贮这一技术手段，可通过乳酸发酵技术来提升构树树叶适口性，为构树树叶青贮发酵和饲用化提供了技术支持。

现有的构树发酵方法存在的缺陷是：

1、现有的构树发酵方法在构树青贮发酵过程中无法控制适当比例的可溶性还原糖的添加，导致乳酸菌发酵的比例较低，纯度不高，制取效率较低；

2、现有的构树发酵方法在构树青贮发酵过程中无法通过调整乳酸菌的发酵程度，调节发酵时的pH值，对有害微生物无法进行有效的抑制繁殖，导致有害生物干扰乳酸菌的发酵质量，进而影响构树青贮饲料的发酵质量；

3、现有的构树发酵方法在构树青贮发酵过程中无法对培养物内部的蛋白予以适当抑制，无法保证乳酸菌的有氧稳定性，进而影响构树发酵产物的稳定性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高品质的青贮构树发酵方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高品质的青贮构树发酵方法，包括有以下工作步骤:

步骤一：选定青贮原料，青贮原料为第三茬全株杂交构树，刈割高度离地15cm，自然风干30min后，用铡草机切碎为1.5-2.5cm小段进行青贮封装；

步骤二：设置对照组CK和对比组P97、P94和P91，其中P97内部添加浓度为3％的玉米淀粉液，P94内部添加浓度为6％的玉米淀粉液，P91内部添加浓度为9％的玉米淀粉液；

步骤三：MRS培养基的准备:

(A)将10g蛋白胨、5g牛肉粉、4g酵母粉、2g葡萄糖、1ml吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、2g柠檬酸三铵、0.2g硫酸镁、0.05g硫酸锰、15g琼脂粉加入无菌培养瓶中，随后添加1000ml蒸馏水中混合均匀；

(B)对(A)中的混合液进行加热溶解；

(C)利用pH计对(B)中的混合液的酸碱值进行检测，并将pH调整至5.5-6.7；

(D)将调制好的MRS培养基，并予以编号1-30；

步骤四：菌种接种培养：

(一)将步骤一中切碎的构树树叶和编号1-15的MRS培养基分别装入PVC真空封口袋进行分装处理，随后集中高温灭菌15-20分钟；

(二)将(一)中的分装处理后的MRS培养基在实验室中避光储存60天后开封。

步骤五：使用钙圈溶法对菌种分离纯化；

(A)将步骤二中发酵好的溶液稀释；