[发明专利]一种同步测定保健食品中七种维生素的检测方法

权利要求书

1.一种同步测定保健食品中七种水溶性维生素的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

(1)样品溶液的制备：样品过筛后混合均匀，称取适量样品，加入盐酸溶液并水浴超声提取一定时间，然后用水定容摇匀，离心，取上清液过滤，待测；

(2)标准系列溶液的制备：分别称取维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、维生素B₁₂、烟酰胺、烟酸和叶酸标准品，配制一系列浓度的标准系列溶液；

(3)上机检测：

将样品溶液和标准系列溶液溶液加入高效液相色谱仪中进行梯度洗脱；洗脱采用的流动相A为乙腈，流动相B为0.1％三氟乙酸溶液；

所述梯度洗脱方式为：0～0.7min，流动相B的体积百分比保持100.0％不变；0.7～5min，流动相B的体积百分比从100.0％变化至97.0％；5～6min，流动相B的体积百分比从97.0％变化至85.0％；6～11min，流动相B的体积百分比从85.0％变化至80.0％；11～11.5min，流动相B的体积百分比从80.0％变化至10.0％；11.5～15.5min，流动相B的体积百分比保持10.0％；15.5～16min，流动相B的体积百分比从10.0％变化至100.0％；16～20min，流动相B的体积百分比保持100.0％不变；

检测波长为280nm。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的色谱条件还包括：色谱柱：C18色谱柱或性能相当者；流速：1.00～1.30mL/min；柱温：30℃；进样量：10～20μL；检测器：紫外检测器。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中的样品过1.00mm孔径分子筛，筛上物不大于3％，混合均匀；准确称取1～3g样品，置于容量瓶中，加入盐酸溶液50～70mL，80℃水浴超声提取30min，中间振摇2～3次，用水定容，摇匀，于离心机上4000r/min离心5min，取上清液适量过滤膜即得样品溶液。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中首先分别配制浓度均为200μg/mL的各维生素标准贮备溶液，然后分别移取各标准贮备溶液于同一容量瓶中，0.1％三氟乙酸溶液定容，配制浓度为20μg/mL的混合标准溶液；最后移取混合标准溶液配制浓度为0.50μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL、5.00μg/mL、10.00μg/mL的标准系列溶液。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述C18色谱柱长度为250mm，内径4.6mm，粒径5μm。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法的数据处理为：样品中维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、维生素B₁₂、烟酰胺、烟酸和叶酸的含量以质量分数X_i计，数值以mg/kg表示，按下述公式计算：

式中：

ci--标准曲线上查得的某种维生素浓度的数值，单位为μg/mL；

V--试样提取时定容体积，单位为mL；

m--试料的质量，单位为g；

n--稀释倍数。