[发明专利]一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物及其试剂盒在审
申请号: | 202110751367.7 | 申请日: | 2021-07-02 |
公开(公告)号: | CN113322337A | 公开(公告)日: | 2021-08-31 |
发明(设计)人: | 张可欣;王慧;魏星 | 申请(专利权)人: | 北京华诺奥美医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/14;C12N15/11 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 杨俊华 |
地址: | 100000 北京市丰台区外环西路2*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 葡萄球菌 耐药性 引物 探针 组合 及其 试剂盒 | ||
1.一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物,其特征在于,包括针对葡萄球菌属Tuf基因的第一引物组和第一探针、第二引物组和第二探针,以及针对耐药基因的第三引物组和第三探针;
所述葡萄球菌属Tuf基因的第一引物组包括第一上游引物和第一下游引物,第一上游引物、第一下游引物和第一探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ IDNO.3所示;
所述葡萄球菌属Tuf基因的第二引物组包括第二上游引物和第二下游引物,第二上游引物、第二下游引物和第二探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ IDNO.6所示;
所述耐药基因的第三引物组包括第三上游引物和第三下游引物,第三上游引物、第三下游引物和第三探针的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示;
所述第一探针的5′端、所述第二探针的5′端以及第三探针的5′端均标记有荧光基团,所述第一探针的3′端、所述第二探针的3′端以及第三探针的3′端均标记有淬灭基团。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物,其特征在于,所述耐药基因为耐甲氧西林mecA基因。
3.根据权利要求1所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物,其特征在于,所述荧光基团包括FAM、Cy5、ROX、VIC和NED中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物,其特征在于,所述淬灭基团包括QSY、MGB和BHQ1中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的引物和探针组合物,其特征在于,所述葡萄球菌属包括金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、木糖葡萄球菌、表皮葡萄球菌、头状葡萄球菌和屎肠球菌。
6.一种用于检测葡萄球菌属耐药性的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测液、DNA聚合酶、dNTPs、qPCR缓冲液、ROX参比荧光染料、空白对照品和阳性对照品。
7.根据权利要求6所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的试剂盒,其特征在于,所述检测液包括权利要求1中的第一引物组和第一探针、第二引物组和第二探针、第三引物组和第三探针。
8.根据权利要求6所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的试剂盒,其特征在于,所述空白对照品为RNase-free ddH2O。
9.根据权利要求6所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的试剂盒,其特征在于,所述阳性对照品为细菌基因组DNA样本。
10.根据权利要求6所述的一种用于检测葡萄球菌属耐药性的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒在辅助检测区分革兰氏阳性菌属、种及其耐药性中的非诊断目的的应用。
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