[发明专利]一种具有美白效果人参水蛭素发酵液的制备方法

说明书

本发明涉及一种具有美白效果人参水蛭素发酵液的制备方法，所述方法包括原料预处理、酶解步骤、均质处理、发酵处理，所述发酵处理获得的均质物料，加入重组水蛭素酵母菌INVSc1‑Hr2进行发酵处理；所述重组水蛭素酵母菌INVSc1‑Hr2是将Hr2基因构建于质粒pYES2，通过化学转化法重组于酿酒酵母INVSc1中，获得重组菌株INVSc1‑Hr2。本发明是采用重组水蛭素对人参根提取物进行中药发酵，以前没有报道过此种发酵方法；结合人参补气和水蛭素活性的功效，达到气血双补的作用；本方案对人参提取物进一步酶解，有利于大分子的降解、吸收，人参多糖水解之后为重组水蛭素酿酒酵母提供原料；本方法相较于人参提取液，不需要用到有机溶剂，如乙醇等，对环境友好，同时不会刺激皮肤。

技术领域

本发明涉及生物技术技术领域，具体地说涉及一种具有美白效果人参水蛭素发酵液的制备方法。

背景技术

人参具有得天独厚的滋补美容效果，作为中国传统的美容护肤佳品，其美白抗皱延缓衰老功效得到一致认可，并从20世纪80年代开始应用于化妆品中，如人参润肤霜、人参美白霜、人参面膜等多种人参化妆品，成为目前使用最为广泛的植物化妆品原料。人参美白霜中含有人参皂苷Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rh1和三七皂苷R2(金贵歆，中医药现代化，2009)。人参皂苷Rg1的剂量浓度为10～80μg/mL时，能抑制黑色素细胞增殖，减少黑色素合成(赵保胜，人参研究，2011)。人参皂苷Rb及人参皂苷Rd可抑制基质金属蛋白酶MMP-1和MMP-3表达(邓茂，皮肤性病诊疗学杂志,2010)。研究发现，在UVB诱导的成纤维细胞光老化模型中，人参提取物可同时调节MAPKs及NF-kB信号通路，抑制MMP-l与MMP-13的异常分泌，达到抗光老化作用(Yong，NutrRes,2012)。

人参是五加科人参属植物的干燥根，人参的主要活性成分为人参皂苷和人参肽，人参肽的稳定性较差，传统高温提取的方式往往得不到具有活性的人参肽。人参作为一种名贵的古老中药，被广泛应用，历代医书中都有记载。现代生物学及医学研究表明人参具有多方面的药理和生物学活性。低聚肽在人体内不需消化即可直接吸收，比单个氨基酸更易吸收，可直接参与蛋白质的合成，避免活性物质的浪费，大大提高其生理调节作用。因此，探索一种新的人参活性肽的制备方法具有重要意义。

微射流是通过高压破碎的技术，可以在常温下破碎各种生物细胞，释放胞内活性成分，广泛用于对温度敏感活性成分的提取。微射流是在超高压(310MPa)的压力作用下，经过孔径很微小的阀心，产生几倍音速的流体，从而达到分均质破碎细胞的作用。现有的超高压提取工艺是在常温下，将粉碎至～定粒度的中药材，浸泡于一定比例的提取溶液中，置于超高压反应釜中，进行受压处理。当压力升到设定值时，瞬间卸压，利用细胞壁内外巨大的压力反差将细胞组织破裂粉碎，使其有效成分全部溶于溶液中，不损害植物细胞中的热敏性物质。

公开号CN111227102A发明名称为一种人参活性肽的制备方法及其应用的发明专利申请，公开了人参活性肽的制备方法包括以下步骤：将人参预处理后，进行提取得到人参提取液，将人参提取液酶解后进行纯化处理，得到人参活性肽溶液。该方法通过提取、酶解和纯化等步骤，得到人参活性肽溶液，其提取过程在100℃左右的较高温度下进行，对固有营养物质破坏较大。

公开号CN107802670A发明名称为具有补气固脱作用的含人参活性肽的中药组合物及其制备方法和用途的发明专利申请，该申请公开的方法中包括固体部分加入水，于75～100℃下加热20～35分钟酶解；加入黄芪和白术，加热回流提取，过滤得到混合液；和混合液离心、浓缩、喷雾干燥，得到所述中药组合物。其中，灭酶步骤灭酶温度为90-125℃，灭酶时间为0.5-3h。该方法同样存在原料预处理时间长，高温提取、灭菌等操作，不利于原料中营养物质的保留。