[发明专利]一种从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物，其特征在于，所述的双环吡咯醛类化合物的结构式为：。

2.权利要求1所述的从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取：将香菇的子实体自然晾干，然后在粉碎机中粉碎后，放进的不锈钢渗漉桶中，加入体积浓度为95%的工业乙醇直至浸没粉碎的香菇子实体，浸泡三天后，放出乙醇，如此操作，共提取三次，将三次收集乙醇液合并得含有香菇成份的提取液，随后利用旋转蒸发仪、真空泵和低温冷却循环泵将上述提取液减压蒸馏至5L的浓缩液；

(2)萃取：将5L浓缩液倒进20L分液漏斗，再加入5L乙酸乙酯，摇晃分液漏斗，使浓缩液和乙酸乙酯充分接触后，静置分层，分取上层乙酸乙酯层，下层水液继续和乙酸乙酯按照体积比1：1萃取，如此萃取四次得总乙酸乙酯层，减压浓缩除去乙酸乙酯得香菇子实体脂溶性化合物粗浸膏；

(3)分离：粗浸膏加入其体积1.5倍的甲醇溶解转移至合适的蒸发皿中，加入粗浸膏重量15-20倍的正相硅胶吸附样品，在恒温60℃的水浴锅上挥干溶剂，在研砵中研磨成粉状；取玻璃柱一根，下端塞入棉花，加入粗浸膏重量20-25倍正相硅胶，再加入粗浸膏重量20-25倍的石油醚，接着将吸附有样品的正相硅胶装入该玻璃柱中，石油醚和丙酮梯度洗脱，每500mL接一瓶，减压浓缩至溶剂挥干，用甲醇溶解、胶头滴管转移至5mL的小瓶中，点板显色合并成7个组分A-G，组分E经中压液相色谱，洗脱剂为甲醇/水，每500mL接一瓶，减压浓缩至甲醇水挥干，用甲醇溶解、胶头滴管转移至5mL的小瓶中，点板显色合并共得14个组分E1-E14；组分E4过甲醇凝胶柱、点板显色合并后减压浓缩得10个组分E4a-E4j；

(4)纯化：将组分E4c用少量分析甲醇溶解，并用0.22μm的滤膜过滤到1mL的液相小瓶，由半制备高效液相分离纯化得双环吡咯醛类化合物。

3.根据权利要求2所述的从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物的制备方法，其特征在于，所述的点板显色合并过程为将所有小瓶中的样品用毛细管在硅胶板G₂₅₄上点板，在200mL的展开缸中展开，展开剂为5mL的石油醚和丙酮，展开剂到顶端后取出晾干，在紫外灯下观察化合物的荧光后，使用香草醛-浓硫酸-乙醇液均匀喷洒硅胶板后，在电炉上加热显色，将相同或类似的组分合并。

4.根据权利要求2所述的从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(3)中，石油醚和丙酮梯度洗脱具体是按照体积比10：1洗脱10L、5：1洗脱10L、2：1洗脱10L、1：1洗脱10L。

5.根据权利要求2所述的从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤(3)中，甲醇/水洗脱过程为按照体积比20：80、40：60、60：40，80：20，100：0，每个梯度各冲5000mL，流速为35 mL·min⁻¹。

6.根据权利要求2所述的从香菇中提取的双环吡咯醛类化合物的制备方法，其特征在于， 所述的半制备高效液相条件为：Zorbax SB-C18 柱子粒径5μm，规格9.4mm × 150mm，流速7mL×min^-1，流动相乙腈和水体积比0:100-25:75，25min，检测器是DAD，检测波长为205、220和254nm。

7.权利要求1所述的双环吡咯醛类化合物在制备抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖药物中的应用。

8.权利要求2-6任一项制备的双环吡咯醛类化合物在制备抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖药物中的应用。