[发明专利]一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1及其应用

权利要求书

1.一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1，分类命名为黑曲霉菌（Aspergillus niger），于2021年04月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22415，保藏地址：北京市朝阳区北辰路1号院3号。

2.权利要求1所述的黑曲霉菌HQ-1在制备纳米银中的应用。

3.权利要求1所述的黑曲霉菌HQ-1制备纳米银的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）、取黑曲霉菌HQ-1在23℃-27℃条件下，接种到PDA固体培养基上培养，培养5-10天后，黑曲霉菌丝长满平板培养基的表面，用无菌水冲洗平板培养皿，收集得到黑曲霉菌的孢子液，-80℃保藏；

所述的PDA固体培养基pH为5.5~7.0；

（2）、吸取200μL黑曲霉HQ-1的孢子液涂布到PDA固体培养基上，置于24℃-26℃恒温培养箱中静置培养，培养3-5天后，PDA固体培养基上长出黑曲霉的菌丝，用无菌牙签挑取菌丝转入100mL 改良PDB培养基中，置于23℃-27℃，150rpm的恒温摇床中保持3-5天，用滤纸过滤得到黑曲霉的菌丝体；

所述的改良PDB培养基是由马铃薯浸粉3.0 g、葡萄糖 20.0 g，溶于1L去离子水中制成，pH为6.0~7.5；

（3）、将黑曲霉的菌丝体用无菌蒸馏水清洗3-4次，去除黑曲霉菌丝生物量中的PDB培养基成分，将滤得的黑曲霉菌丝体加入到100mL无菌蒸馏水中浸泡，在25℃，150rpm的条件下培养24h，之后用滤纸过滤得菌丝浸泡的黑曲霉的二次发酵液；

（4）、取100mL黑曲霉的二次发酵液，与1.0 mL的100mM 的AgNO₃溶液在250 mL锥形瓶中混合，然后放入25℃的恒温培养箱，光照强度1000-5000lux条件下照射5-9d，合成纳米银。

4.根据权利要求3所述的黑曲霉菌HQ-1制备纳米银的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）、取黑曲霉菌HQ-1在23℃条件下，接种到PDA固体培养基上培养，培养10天后，黑曲霉菌丝长满平板培养基的表面，用无菌水冲洗平板培养皿，收集得到黑曲霉菌的孢子液，-80℃保藏；

所述的PDA固体培养基pH为5.5；

（2）、吸取200μL黑曲霉HQ-1的孢子液涂布到PDA固体培养基上，置于24℃恒温培养箱中静置培养，培养5天后，PDA固体培养基上长出黑曲霉的菌丝，用无菌牙签挑取菌丝转入100mL 改良PDB培养基中，置于23℃，150rpm的恒温摇床中保持5天，用滤纸过滤得到黑曲霉的菌丝体；

所述的改良PDB培养基pH为6.0；

（3）、将黑曲霉的菌丝体用无菌蒸馏水清洗3次，去除黑曲霉菌丝生物量中的PDB培养基成分，将滤得的黑曲霉菌丝体加入到100mL无菌蒸馏水中浸泡，在25℃，150rpm的条件下培养24h，之后用滤纸过滤得菌丝浸泡的黑曲霉的二次发酵液；

（4）、取100mL黑曲霉的二次发酵液，与1.0 mL的100mM 的AgNO₃溶液在250 mL锥形瓶中混合，然后放入25℃的恒温培养箱，光照强度1000lux条件下照射9d，合成纳米银。