[发明专利]一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1及其应用

说明书

一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ‑1，分类命名为黑曲霉菌（Aspergillus niger），于2021年04月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22415，保藏地址：北京市朝阳区北辰路1号院3号。所述的黑曲霉菌HQ‑1在制备纳米银中的应用；本发明黑曲霉菌HQ‑1是筛选出的新的菌株，能够实现简便、高效、低成本的合成纳米银，制备过程中不牵涉到有毒有害的化学试剂，安全环保，对制备纳米银的研究扩展提供技术支持，有显著的社会和经济效益。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别是一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1及其应用。

背景技术

众所周知，银是一种强效的杀菌抗菌材料，特别是纳米银粒子，由于具有独特的物理化学性质，目前被广泛用于航天、电子、光学、生化、医学等众多领域，在实际生活中，已经发展出多种制备纳米银材料的方法，主要分为化学制备法、物理制备法和生物制备法，其中以化学法为主要制备方式。但化学制备法在制备过程中需要用到多种化学试剂，比如柠檬酸钠、抗坏血酸、乙二胺、丙三醇等，反应过程复杂，且容易造成环境污染；物理制备法多是利用高速破碎、激光脉冲或高压电离等方式制备得到纳米银，此法对仪器的要求比较高，并且能耗大，成本高；而生物制备法因其制备过程简单，不涉及高能精密的大型仪器，并且具有安全环保等优点，逐渐受到大众的青睐。

生物制备法除了植物提取液制备纳米银之外，还有利用微生物发酵的方式制备纳米银。利用芽孢杆菌发酵生产还原酶制备纳米银，以及利用曲霉的粗酶液合成纳米银均有相关研究，并且制备纳米银的大小在10nm左右。大量细菌和一些真菌都具有发酵制备纳米银的能力，但需要指出的是，在很大程度上，多数真菌相对于细菌的培养条件更简单，生长旺盛，菌丝体和发酵液易于分离，便于实验操作，因此，寻找一株安全环保并且能高效制备纳米银的真菌菌株是研究解决的关键技术问题。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1及其应用，可有效解决不能安全环保并且高效制备纳米银的问题。

为实现上述目的，本发明解决的技术方案是，一株用于制备纳米银的黑曲霉菌HQ-1，分类命名为黑曲霉菌（Aspergillus niger），于2021年04月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22415，保藏地址：北京市朝阳区北辰路1号院3号。

所述的黑曲霉菌HQ-1在制备纳米银中的应用。

所述黑曲霉菌HQ-1制备纳米银的方法，包括以下步骤：

（1）、取黑曲霉菌HQ-1在23℃-27℃条件下，接种到PDA固体培养基上培养，培养5-10天后，黑曲霉菌丝长满平板培养基的表面，用无菌水冲洗平板培养皿，收集得到黑曲霉菌的孢子液，-80℃保藏；

所述的PDA固体培养基pH为5.5~7.0；

（2）、吸取200μL黑曲霉HQ-1的孢子液涂布到PDA固体培养基上，置于24℃-26℃恒温培养箱中静置培养，培养3-5天后，PDA固体培养基上长出黑曲霉的菌丝，用无菌牙签挑取菌丝转入100mL 改良PDB培养基中，置于23℃-27℃，150rpm的恒温摇床中保持3-5天，用滤纸过滤得到黑曲霉的菌丝体；

所述的改良PDB培养基是由马铃薯浸粉3.0 g、葡萄糖 20.0 g，溶于1L去离子水中制得，pH为6.0~7.5；

（3）、将黑曲霉的菌丝体用无菌蒸馏水清洗3-4次，去除黑曲霉菌丝生物量中的PDB培养基成分，将滤得的黑曲霉菌丝体加入到100mL无菌蒸馏水中浸泡，在25℃，150rpm的条件下培养24h，之后用滤纸过滤得到菌丝浸泡液，即黑曲霉的二次发酵液；