[发明专利]血小板外泌体结合干细胞外泌体的混合冻晶粉及其制作方法

权利要求书

1.一种混合冻晶粉，其特征在于，包含有：

一血小板外泌体；以及

一干细胞外泌体。

2.根据权利要求1所述的混合冻晶粉，其特征在于，其中所述血小板外泌体是由一使用者血液中取得。

3.根据权利要求1所述的混合冻晶粉，其特征在于，其中所述干细胞外泌体是取得于包含哺乳类动物骨骼、哺乳类动物脐带、哺乳类动物脂肪或哺乳类动物血液的干细胞。

4.根据权利要求1所述的混合冻晶粉，其特征在于，其中所述混合冻晶粉的取得方法包含：

以超速离心法对一血小板血浆样本或一全血样本进行萃取，得到所述血小板外泌体；及，

以超速离心法对一干细胞样本或一干细胞培养基样本进行萃取，得到所述干细胞外泌体；接着

(1)混合所述血小板外泌体与所述干细胞外泌体后以-80℃急速冷冻及-55℃冷冻干燥，或(2)将所述血小板外泌体与所述干细胞外泌体以-80℃急速冷冻及-55℃冷冻干燥后混合，即取得所述混合冻晶粉。

5.一种混合冻晶粉的制作方法，其特征在于，包含下列步骤：

对一血小板血浆样本进行离心以取得一第一血小板外泌体；

对一全血样本进行离心以取得一血小板样本，接着对所述血小板样本进行离心以取得一第二血小板外泌体；

对一干细胞培养基样本进行离心以取得一第一干细胞外泌体；

对一干细胞样本进行超音波震荡及离心以取得一第二干细胞外泌体；

分别冷冻干燥所述第一血小板外泌体、所述第二血小板外泌体、所述第一干细胞外泌体以及所述第二干细胞外泌体，以形成一第一血小板外泌体的粉末、一第二血小板外泌体的粉末、一第一干细胞外泌体的粉末及一第二干细胞外泌体的粉末；以及

将所述第一血小板外泌体的粉末及所述第二血小板外泌体的粉末中之一者与所述第一干细胞外泌体的粉末及所述第二干细胞外泌体的粉末中之一者混合以形成所述混合冻晶粉。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，其中对一血小板血浆样本进行离心以取得一第一血小板外泌体的步骤，进一步包含以下子步骤：

以300xg的加速度对所述血小板血浆样本进行离心15分钟以获得一第一血小板血浆样本；

以2000xg的加速度对该第一血小板血浆样本进行离心15分钟以获得一第二血小板血浆样本；

以孔径为0.22μm的过滤器过滤所述第二血小板血浆样本；

以4000xg的加速度对过滤后的所述第二血小板血浆样本进行离心15分钟以获得一第三血小板血浆样本；以及

以切向流过滤系统(Tangential Flow Filtration System,TFF)对所述第三血小板血浆样本进行分离以取得所述第一血小板外泌体。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，其中对一全血样本进行离心以取得一血小板样本，接着对所述血小板样本进行离心以取得一第二血小板外泌体的步骤，进一步包含以下子步骤：

将所述全血样本于室温中以2600xg的加速度离心30分钟，以获得一全血样本沉淀物以及一上清液；

将所述上清液加入2U/mL的肝素并以500xg的加速度离心10分钟两次以产生一第一上清液；

将所述第一上清液以2000xg的加速度离心15分钟两次以产生一第二上清液；

将所述第二上清液以10000xg的加速度离心30分钟两次以产生一第三上清液；

将所述第三上清液以30000rpm的转速于4℃温度下离心1小时以产生一第四上清液；

以孔径为0.22μm的一过滤器过滤所述第四上清液；以及

以4000xg的加速度对过滤后的所述第四上清液进行离心90分钟以产生一第五上清液；

以切向流过滤系统对所述第五上清液进行分离以取得所述第二血小板外泌体。