[发明专利]一种表达犬细小病毒2a型VP2的重组犬瘟热病毒

权利要求书

1.一种核酸片段，其特征在于，所述的核酸片段的结构为5′-N-P-VP2-M-F-H-L-3′；其中N、P、M、F、H、L分别为犬瘟热病毒CDV的结构基因；VP2为犬细小病毒CPV-2a VP2的开放阅读框ORF；且VP2 ORF的5′末端添加Kozak序列。

2.如权利要求1所述的核酸片段，其特征在于，所述的核酸片段中，在VP2 ORF上游包含M基因起始序列，下游包含P基因终止序列。

3.如权利要求2所述的核酸片段，其特征在于，所述的核酸片段的序列为SEQ ID NO:1。

4.权利要求1-3任一项所述核酸片段在细胞内拯救重组犬瘟热病毒的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的细胞为BSR-T7/5细胞和Vero-Dog-SLAM(VDS)细胞。

6.一种拯救重组犬瘟热病毒的方法，其特征在于，所述的方法是使用权利要求1-3任一项所述核酸片段在细胞内拯救重组犬瘟热病毒。

7.一种能表达犬细小病毒2a型VP2的重组犬瘟热病毒，其特征在于，所述的重组犬瘟热病毒是使用权利要求1-3任一项所述核酸片段在细胞内拯救获得重组犬瘟热病毒。

8.权利要求7所述的重组犬瘟热病毒在制备疫苗中的应用。

9.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗的抗原包含有权利要求7所述的重组犬瘟热病毒。

10.一种用于检测权利要求7所述的重组犬瘟热病毒的引物对，其特征在于，所述的引物对中，上游引物序列为5′-TCAAGAGTATTACTCATGCTTAA-3′，下游引物序列为5′-TCGAAGTCGTACACCTCAGTCAT-3′。