[发明专利]南瓜籽源锌络合肽及其序列

说明书

本发明公开了南瓜籽源锌络合肽及其序列，属于食品加工领域。本发明提供南瓜籽源锌络合肽及其相应的制备方法，所述肽的氨基酸序列是RPKHPLK或者RPKHPLSHDL，对锌的络合率分别为56.48±0.69％和92.87±0.41％。本发明所得到的肽可以用于制备易被人体肠胃吸收的络合锌。

技术领域

本发明涉及南瓜籽源锌络合肽及其序列，属于食品加工领域。

背景技术

南瓜的食用价值和药用价值非常高，中医史书就有了南瓜的食疗记载，南瓜全身都是宝，南瓜籽中的营养成分也十分丰富，南瓜籽中含有丰富的油脂、蛋白质、维生素、多不饱和脂肪酸和类胡萝卜素等。近年来，南瓜籽因其营养和保健作用而受到人们的广泛关注。它也被用作降血糖剂。南瓜籽的味道和坚果味都很独特，人们把南瓜籽腌制后烤成零食食用，南瓜籽也常用来榨油。南瓜籽的氨基酸组成含有人体必需的八种氨基酸与组氨酸，并且其必须氨基酸的比例与人体所需的模式相似。此外南瓜籽富含铁、蛋白质、锰、镁、锌、钾、铜、磷、多不饱和脂肪酸(PUFA)、α-生育酚和类胡萝卜素。南瓜籽油能改善膀胱过度活跃导致的的泌尿系统紊乱，南瓜籽的提取物可以改善泌尿功能障碍和前列腺增生，还具有抗氧化、抗炎和抗菌的功效，但是南瓜籽经过榨油之后的商业价值会降低，大部分被用来当作动物饲料来使用。但南瓜籽粕中含有丰富的植物蛋白，为了提高南瓜籽粕的经济效益，有必要对南瓜籽粕蛋白进行生理功能的探索与开发。

锌是人体必需的微量元素之一，它被称为“生命元素”，对于维持人体正常的生命活动和生理状态有着非常重要的意义，而且锌是唯一可以与所有六大酶类(氧化还原酶，水解酶，裂解酶，转移酶，连接酶和异构酶)相互作用的金属离子。缺锌会使人体的机能受到损害，儿童缺锌会导致生长发育变迟缓，成年人缺锌会导致机体性腺机能的损伤。目前促进锌吸收的方式有四种：一是降低食物基质中的植酸盐含量。二是添加补锌剂，常见的补锌剂有无机酸锌盐、有机酸锌盐、氨基酸络合锌、肽络合锌四种。三是以甘氨酸络合锌为代表的氨基酸络合锌。第四种以酪蛋白磷酸肽络合锌为代表的锌络合肽。肽锌络合物中的锌相对于无机盐中的锌更容易被肠胃吸收。

以植物加工过程的副产物为原料开发的植物蛋白源的锌络合肽是近年来研究的热点。例如，花生、榛子、绿豆、玉米、芝麻、小麦胚芽、大麻、核桃和油菜籽中的蛋白源肽，含有较为丰富的锌络合氨基酸，如丝氨酸、组氨酸和精氨酸等。虽然，目前已经鉴定出多种锌络合肽，但为了制备成本更低、锌络合效果更好和生物利用度更高的锌络合肽，需要寻找更合适的肽源。

发明内容

[技术问题]

本发明要解决的技术问题是现有的肽锌络合物存在成本高、锌络合效果不佳的不足。

[技术方案]

本发明提供南瓜籽源锌络合肽，其氨基酸序列是RPKHPLK(SEQ ID NO:1)或者RPKHPLSHDL(SEQ ID NO:2)，优选RPKHPLSHDL。

本发明提供一种制备、筛选南瓜籽源锌络合肽的方法，包括以下步骤：

(1)利用碱溶酸沉法制备南瓜籽蛋白粉末，

(2)南瓜籽源肽的制备：将南瓜籽蛋白粉末溶解，并通过加热使得南瓜籽蛋白中内源性酶失活，利用木瓜蛋白酶酶解；酶解完成后，加热灭酶，冷却后调节pH至中性，离心并丢弃沉淀、保留上清，将上清液过滤并冻干得到南瓜籽蛋白水解产物；

(3)通过优化步骤(2)木瓜蛋白酶酶解的条件，以提高所得南瓜籽蛋白水解产物的锌络合率，并得到锌络合率较高的南瓜籽蛋白水解产物；

(4)将步骤(3)得到的锌络合率较高的南瓜籽蛋白水解产物利用固定化金属亲和层析、葡聚糖G-25凝胶层析进行纯化，得到南瓜籽源锌络合肽，用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用仪对南瓜籽源锌络合肽的氨基酸序列进行鉴定，得到南瓜籽源锌络合肽的氨基酸序列，采用固相合成南瓜籽源锌络合肽。