[发明专利]一种盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法

说明书

本发明涉及盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法，采用高效液相色谱法测定，其操作步骤如下：1)对照品溶液制备；2)样品溶液制备；3)分别取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，测定。本发明方法实验步骤简洁、检测数据精准、稳定性好、安全性高、检测成本低。

技术领域：

本发明涉及化学检验领域和药物分析技术领域，特别是一种盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法。

背景技术：

枸橼酸是注射液中常用的辅料，临床上常用做pH调节剂，同时枸橼酸根离子可与血中钙离子生成难解离的可溶性络合物枸橼酸钙，此络合物易溶于水但不易解离，凝血过程受到抑制，从而阻止血液凝固。但当体内枸橼酸盐含量过高时，因枸橼酸盐不能及时被氧化，可致低钙血症，引起抽搐和心肌收缩抑制，在盐酸替罗非班注射液的处方中包含了枸橼酸钠，同时用到无水枸橼酸作为pH调节剂，因此必须应严格控制枸橼酸的含量。

《中国药典》2020版四部通则中枸橼酸的含量测定采用滴定法，酚酞作指示剂，氢氧化钠滴定液作滴定剂。该方法存在一定的人为误差不可避免，且枸橼酸的用量较大，而注射剂中枸橼酸的含量相对较小，方法不适用。

《中国药典》2020版四部通则中枸橼酸钠的含量测定采用高氯酸滴定法，过程中需要加热溶解，且高氯酸危险性较高，操作过程复杂，人为因素不可避免。

故本发明采用高效液相色谱法对盐酸替罗非班注射液中枸橼酸进行含量测定，本法简单可行，准确度高、精密度好、稳定性高。

发明内容：

针对现有的枸橼酸含量测定存在的上述问题，现提供一种准确度高、精密度好、稳定性高的盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法。

本发明涉及的一种盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法采用高效液相色谱法测定，其操作步骤如下：

(1)色谱条件建立与系统适应性：采用耐水性的C18柱，以100％磷酸溶液，为流动相，检测波长为200～240nm，流速为每分钟1.0～1.5ml，柱温为25～42℃；

(2)对照品溶液的制备：取枸橼酸钠对照品，加水溶解，得对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备：以盐酸替罗非班注射液作为供试品溶液；

(4)测定：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

优选的，前述步骤(1)所述对照品溶液每1ml含枸橼酸钠1.5mg。

优选的，前述步骤(2)所述供试品溶液每1ml含盐酸替罗非班0.05mg。

优选的，前述步骤(3)所述色谱柱为菲罗门Titank C18，规格为4.6mm*250mm，5μm。

优选的，前述步骤(3)所述磷酸溶液用磷酸调水pH至2.1。

优选的，前述步骤(3)所述色谱条件中检测波长为220nm。

优选的，前述步骤(3)所述柱温为30℃。

优选的，前述步骤(3)所述柱温为40℃。

优选的，前述步骤(3)所述流速为每分钟1.2ml。

优选的，前述步骤(4)对照品溶液和供试品溶液进样量分别为5μl。

有益效果:

1、本发明提供的盐酸替罗非班注射液中枸橼酸含量测定方法，能够准确地检测盐酸替罗非班注射液中枸橼酸和枸橼酸钠，可使枸橼酸与注射液中的其他物质分开，实现枸橼酸的准确检测，从而更好地控制盐酸替罗非班注射液的产品质量。

2、本发明以水作为测试溶剂，实验步骤简洁，检测数据精准、稳定性好，安全性高，检测成本低。