[发明专利]基于细菌小细胞的生物药物的电离辐射灭菌以及使用方法

说明书

本申请公开了通过暴露于电离辐射最终灭菌细菌小细胞或包含细菌小细胞的组合物的方法。还公开了最终灭菌的细菌小细胞、包含所述细菌小细胞的药物组合物、以及使用所述细菌小细胞和所述药物组合物的方法。

相关申请

本申请根据35 U.S.C.§119(e)要求于2015年8月4日提交的美国临时申请第62/200,903号的优先权。将该相关申请的内容通过引用整体明确地并入本文中。

发明背景

领域

本申请涉及用于真细菌小细胞的生产、纯化、配制和最终灭菌的组合物和方法，其用作用于检测、治疗和预防癌症、遗传病症、传染性疾病和其它疾病的诊断、治疗和预防性生物药物产品和药剂。

相关领域的描述

提供以下本发明的背景的描述以帮助理解本发明，但并不是认可其描述或构成了本发明的现有技术。本申请中提及或引用的文章、专利和专利申请以及所有其它文件和电子可得信息的内容在此通过引用整体并入，至如同每一单独的出版物具体且单独地指明为通过引用并入的程度。申请人保留将来自任何这些文章、专利、专利申请或其它文件中的任何和所有材料和信息物理地并入本申请中的权利。

在设计选择性靶向和治疗癌症和/或用作疫苗的新的生物药物产品的开发中，将细菌小细胞和其它生物相容性微粒和纳米颗粒用作小分子药物和大分子药物递送媒介物已成为越来越受关注的领域。细菌小细胞是球形纳米尺寸(约400nm)的颗粒，其可由重组产小细胞的细菌菌株产生。除了细菌染色体以外，小细胞含有其亲代细菌的所有组分和分子成分。因此，小细胞不是活的，不能复制，并且是非传染性的，使得它们非常适合作为体内递送媒介物和疫苗，而无感染风险。如本文更详细描述的，因为小细胞来源于高度适于重组工程、重组表达技术和简易分子生物学技术的细菌菌株，它们也非常适于重组工程，并且与其它纳米递送技术相比，它们易于转化为靶向药物递送和疫苗媒介物。

开发用于人类的基于重组细菌小细胞的生物药物的主要障碍之一是使用基于常规标准过滤的方法可靠地灭菌这些产物的能力，因为小细胞常常保留在保留物中，并且不容易通过标准的0.22微米过滤膜。如US 2004/0265994中所述，用于将小细胞纯化为生物药物产品的其它基于过滤的方法不能提供使用根据ICH指南的验证灭菌方法一致的无菌性保证。另外，该方法将多个额外的步骤引入小细胞的下游加工，包括在抗生素的存在和高盐浓度下进行长时间孵育，其中每一种都需要额外的表征测试其各自在最终药物产品中去除。

因此，需要有效且可靠的方法来灭菌基于细菌小细胞的生物药物产品。

发明概述

本文公开了产生旨在用于药物用途的最终灭菌的细菌小细胞的方法，其包括使包含多个细菌小细胞的组合物暴露于电离辐射。电离辐射可以是，例如，γ辐射、E-束(电子束、β辐射)辐射、X-射线(光子)辐射和UV辐射。电离辐射的优选类型之一是γ辐射。在一些实施方案中，电离辐射处于约5kGy至约40kGy的剂量。在一些实施方案中，电离辐射处于约25kGy的剂量。在一些实施方案中，γ辐射的剂量足以将组合物灭菌至符合USP 38 NF 33版的USP71标准的水平。

在一些实施方案中，所述组合物为包含所述细菌小细胞和药学可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法包括产生包含所述细菌小细胞和药学可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，药学可接受的赋形剂是海藻糖。在一些实施方案中，所述组合物是包含所述细菌小细胞和药学可接受的稀释剂的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法包括产生包含所述细菌小细胞和药学可接受的稀释剂的药物组合物。在一些实施方案中，所述药学可接受的稀释剂是无菌水。