[发明专利]五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法及鉴别方法

权利要求书

1.五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法，其特征在于，包括绿原酸、蒙花苷、秦皮乙素、木犀草苷4种有效成分的含量测定，所述含量测定方法包括以下步骤：

步骤A1，选取金银花、野菊花、紫花地丁、蒲公英、天葵子作为饮片；

步骤A2，五味消毒饮物质基准的制备：将饮片置于砂锅中，加入去离子水，以电陶炉为热源，进行煎煮，沸腾后转文火保持微沸60-80min，加黄酒，再煮三沸后用200目滤布过滤，同法再煎煮一次，合并滤液，在50-60℃下减压浓缩至相对密度为1.10-1.20，冷却，置于-20℃冰箱中冷冻12h，再置于-45℃冷冻干燥24h，粉碎过80目筛，得到五味消毒饮冻干粉；

步骤A3，采用液相色谱法确定五味消毒饮物质基准有效成分的含量；

其中通过该方法所得五味消毒饮物质基准有效成分的含量为：绿原酸含量均值为8.69mg/g，含量范围为6.0849-11.3006mg/g；木犀草苷含量均值为0.3776mg/g，含量范围为0.2573-0.4779mg/g；蒙花苷的含量均值为1.2730mg/g，含量范围为0.8911-1.6549mg/g；秦皮乙素含量均值为0.9795mg/g，含量范围为0.6856-1.2733mg/g。

2.根据权利要求1所述的五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法，其特征在于：步骤A3所述液相色谱法的步骤如下：

步骤S1，供试品溶液的制备：将五味消毒饮冻干粉加入锥形瓶，加入甲醇溶液，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用上述甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用滤膜过滤，取滤液，得到供试品溶液；

步骤S2，对照品溶液的制备：分别将五味消毒饮物质基准有效成分的对照品溶于相应溶剂中，得到对照品溶液；

步骤S3，色谱试验：吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，当对照样品溶液进入色谱仪中，以色谱峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，得到对照样品溶液的标准曲线，供试样品进入色谱仪中，将峰面积带入标准曲线中，得到各有效成分的含量。

3.根据权利要求2所述的五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法，其特征在于：步骤S3所述色谱条件为：色谱柱柱长为100mm，内径为4.6mm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其粒径为2.6μm；绿原酸流动相为甲醇-0.4％的磷酸溶液，检测波长为327nm，理论板数按绿原酸峰计算不低于1000；蒙花苷流动相为甲醇-0.04％的磷酸，体积比50：50，检测波长为334nm，理论板数按蒙花苷峰计算不低于3000；秦皮乙素流动相为1％的冰醋酸-乙腈-甲醇，检测波长为350nm，理论板数按秦皮乙素峰计算不低于3000；木犀草苷流动相为1％的冰醋酸-乙腈-甲醇，检测波长为350nm，理论板数按木犀草苷峰计算不低于3000。

4.五味消毒饮物质基准有效成分的鉴别方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤C1，供试样品的制备：向五味消毒饮冻干粉中加入甲醇，于250W、50kHz条件下超声处理30min，放冷，用滤膜过滤，取滤液，即得供试样品；

步骤C2，色谱定性测试：吸取供试样品10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，统计特征峰的保留时间及相对保留时间。

5.根据权利要求4所述的五味消毒饮物质基准有效成分的鉴别方法，其特征在于：通过与对照品比对指认8个峰，分别为0.56，峰1；1.00，峰2归属于绿原酸；1.11，峰3归属于秦皮乙素；1.22，峰4归属于咖啡酸；3.45，峰5归属于异绿原酸B；3.72，峰6归属于异绿原酸A；4.34，峰7归属于异绿原酸C；5.85，峰8归属于蒙花苷。