[发明专利]五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法及鉴别方法

说明书

本发明公开了五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法，属于药学技术领域。该含量测定包括第一步：选取金银花、野菊花、紫花地丁、蒲公英、天葵子作为饮片，第二步：五味消毒饮物质基准的制备，第三步：采用液相色谱法确定五味消毒饮物质基准有效成分的含量。本发明中还公开了五味消毒饮物质基准有效成分的鉴别方法。本发明通过对五味消毒饮煎煮、浓缩、干燥等工艺考察，确定基本的工艺参数，并采用15批饮片对工艺参数进行验证，制备了15批对应实物，同时建立了物质基准的特征图谱，对有效成分的含量、转移率、出膏率等指标建立相应的质量评价体系，为五味消毒饮制剂的开发奠定基础。

技术领域

本发明属于药学技术领域，具体地，涉及五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法及鉴别方法。

背景技术

五味消毒饮最早记载于清代《医宗金鉴》，具有清热解毒，凉血消肿等功效。现代药理研究表明，其具有广谱抗细菌、真菌、病毒、肿瘤作用，并具有对细菌耐药性低、抗炎、调节免疫的功效。五味消毒饮于临床用于外科感染所致的红、肿、热、痛。用于皮肤科治疗，主要对带状疱疹，痤疮，湿疹，皮痒等具有良好的治疗效果。自国家食品药品监督管理总局(CFDA)于2008年发布了《中药注册管理补充规定》(简称补充规定)简称补充规定，对于经典名方的研发进入了如火如荼的状态。对于处方筛选论证等方面有诸多要求，需要从历史记载、成书年代、处方演变，计量单位考证，用法与用量及现代研究，临床应用等方面进行研究，除此之外，还需对所用药材的基源，种属，有效成分，药理，现代应用，炮制，质量控制等多方面进行文献整理，分析，创新等工作。物质基准是以古代医籍所记载制备工艺为依据所制备的中药药用物质标准。除成型工艺外，其余制备方法应当与古代医籍记载基本一致。以其作为经典名方质量控制的基准，也是衡量制剂与中医临床所使用的药用物质是否一致的标准。

目前，对五味消毒的研究多为药理学的研究，提取工艺、含量测定及特征图谱研究较少，缺少对有效成分的含量、转移率、出膏率等指标建立相应的质量评价体系。

发明内容

本发明的目的在于提供五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法及鉴别方法，通过对五味消毒饮的大量文献考证，最终确定所用药材的基源，产地，炮制，考证其所用计量及加水量，煎煮工艺等以保证五味消毒饮物质基准制备过程的科学性及合理性，遵循古代煎煮工艺并结合现代制药设备及方法进行制备工艺的研究，通过对五味消毒饮煎煮、浓缩、干燥等工艺考察，确定基本的工艺参数，并采用15批饮片对工艺参数进行验证，制备了15批对应实物，同时建立了物质基准的特征图谱，对有效成分的含量、转移率、出膏率等为指标建立相应的质量评价体系，为五味消毒饮制剂的开发奠定基础。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

五味消毒饮物质基准有效成分的含量测定方法，包括绿原酸、蒙花苷、秦皮乙素、木犀草苷的含量测定，所述含量测定方法包括以下步骤：

步骤A1，五味消毒饮物质基准的制备：将金银花、野菊花、紫花地丁、蒲公英、天葵子置于砂锅中，加入去离子水，以电陶炉为热源，进行煎煮，沸腾后转文火保持微沸60-80min，加黄酒，再煮三沸后用200目滤布过滤，同法再煎煮一次，合并滤液，在50-60℃下减压浓缩至相对密度为1.10-1.20，冷却，置于-20℃冰箱中冷冻12h，再置于-45℃冷冻干燥24h，粉碎过80目筛，得到五味消毒饮冻干粉；

步骤A2，绿原酸的含量测定，包括如下步骤：

步骤S11，供试品溶液的制备：将五味消毒饮冻干粉加入锥形瓶，加入50％的甲醇溶液，称定重量，于250W、50kHz条件下超声处理30min，放冷，再称定重量，用上述甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，用滤膜过滤，取滤液，得到供试品溶液；

步骤S12，对照品溶液的制备：将绿原酸对照品溶于50％的甲醇溶液，得到对照品溶液；