[发明专利]一种茯苓菌种培养基的制备方法

权利要求书

1.一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、原料的备用：马铃薯150-200份、胡萝卜50-80份、琼脂粉20-30份、葡萄糖20-22份、磷酸二氢钾1-3份、玉米面5-12份、小麦10-20份、麦麸5-8份、谷糠2-6份、石膏0.5-4份、红糖0.5-1份、松锯末50-70份以及水100-200份。

S2、制备母种培养基：将步骤S1中的马铃薯、胡萝卜加水进行煎煮操作，得到所需的煎煮液，将煎煮液进行过滤处理，并向过滤后的滤液中加入琼脂粉30份、葡萄糖20份以及磷酸二氢钾，混合均匀，加水定容至1升，备用；

S3、制备斜面培养基：将步骤S2中制备的母种培养基分装到试管的内部，灭菌处理，使其成斜面培养基；

S4、制备母种菌丝：将培养基先进行进行消毒处理，然后将茯苓菌核内一块白色茯苓肉接入到步骤S3中的斜面培养基中，移入20-30℃的室内培养5-7天，检查菌丝的生长，待菌丝布满斜面，得到所需的母种菌丝；

S5、制备原种培养基：将玉米面9份、小麦20份、麦麸8份、谷糠2份、石膏0.5份、红糖0.5份以及松锯末60份加水至含水量50份、制备原种培养基进行备用，将原种培养基分装在广口瓶中，进行灭菌冷却处理；

S6、制备原种茯苓菌种：从步骤S4中制备的母种菌丝放入步骤S5中的广口瓶原种培养基中央，28℃恒温培养25-28天，菌丝长满全瓶，即为原种茯苓菌种；

S7、制备生产种培养基：将玉米面5份、小麦8份、玉米10份、麦麸5份、谷糠1份、石膏0.5份、红糖0.5份以及松锯末70份，加水至含水量40-50份，制备生产种培养基，将生产种培养基分装在广口瓶中，进行灭菌冷却处理；

S8、制备生产种茯苓菌种：从步骤S4中制备的母种菌丝放入步骤S7中的聚丙烯包装袋生产中培养基的中央，28℃置于恒温培养箱培养6-8天，菌丝长满全瓶，即为生产种茯苓菌种。

2.根据权利要求1所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中采用蒸汽灭菌的方式进行灭菌处理，灭菌条件为温度121℃，持续时间为30min。

3.根据权利要求1所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S5和步骤S7中先将红糖用水溶化，放入松锯末搅拌均匀，待松锯末充分吸收糖液后，捞出与玉米面、小麦、麦麸、谷糠以及石膏粉搅拌均匀。

4.根据权利要求1所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中作为菌种的茯苓菌核内一块白色茯苓肉在使用之前，对茯苓表面进行清洗及消毒。

5.根据权利要求4所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中将作为菌种的茯苓用水冲洗至无泥沙，擦干茯苓表面后用50-65％酒精进行冲洗，然后用无菌水进行冲洗以将酒精洗去。

6.根据权利要求1所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中培养母种菌丝时的接种量为每5mL的茯苓母菌，配步骤S3中的培养基300-350g。

7.根据权利要求1所述的一种茯苓菌种培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中检查菌丝生长，接种5天后，查看菌丝体生长情况，发现死菌或菌丝生长缓慢，重复接菌。