[发明专利]促细胞团消化解离液及细胞计数方法有效

专利信息
申请号: 202110768311.2 申请日: 2021-07-07
公开(公告)号: CN113564051B 公开(公告)日: 2022-11-11
发明(设计)人: 高毅;李阳;张贵锋;彭青 申请(专利权)人: 广东乾晖生物科技有限公司
主分类号: C12N1/06 分类号: C12N1/06;C12Q1/06
代理公司: 北京市立方律师事务所 11330 代理人: 刘延喜
地址: 523808 广东省东莞市松山湖高*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 细胞 消化 解离 计数 方法
【权利要求书】:

1.一种细胞计数方法,其特征在于,包括以下步骤:

将载有细胞的载体从生物反应器中转移到离心管内,所述载有细胞的载体为细胞培养支架材料,所述细胞在所述细胞培养支架材料上呈细胞团样三维类组织结构;

多次添加磷酸缓冲盐溶液至所述离心管内以对细胞的载体进行反复冲洗,清洗完毕后除去磷酸缓冲盐溶液;

添加促细胞团消化解离液至所述离心管内处理,对所述离心管内样品涡旋0.8~1.5min或者静置2~3min,促使细胞团解离,所述促细胞团消化解离液,包括以质量百分比计的以下原料:聚乙二醇辛基苯基醚1%~5%,烷基糖苷0.1%~4%,非表面活性剂型磺基甜菜碱0.1%~1%,两性离子型去垢剂0.1%~1%,所述两性离子型去垢剂为3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐或3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-2-羟基-1-丙磺酸,pH调节剂1%~10%,所述pH调节剂为正磷酸,其余为水;

加入染色剂对细胞核进行染色;

将离心管内样品稀释至计数器的工作范围,通过对细胞核计数以完成细胞的计数。

2.根据权利要求1所述的细胞计数方法,其特征在于,所述pH调节剂以质量百分比计的含量为4%~5%。

3.根据权利要求1所述的细胞计数方法,其特征在于,所述染色剂为台盼蓝,且所述台盼蓝的终浓度为0.03~0.05%。

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