[发明专利]一种基于LAMP和自身猝灭荧光探针检测鲣鱼的引物组、方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测鲣鱼的引物组，其特征在于，包括一对外引物组，一对内引物组和一对环引物组；所述外引物组为F3和B3，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；所述内引物组为FIP和BIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；所述环引物组为LF和LB，其核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

2.一种利用权利要求1所述引物组检测鲣鱼的方法。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，以待检测样品的基因为DNA模板，利用权利要求1所述引物组进行环介导等温扩增反应，检测鲣鱼。

4.一种检测鲣鱼的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物组。

5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述引物组中，引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB的浓度为5-15μM。

6.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括阳性标准品。

7.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括DNA提取试剂。

8.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括环介导等温扩增反应试剂。

9.根据权利要求3所述方法或权利要求8所述试剂盒，其特征在于，所述扩增反应的反应体系和扩增反应试剂均为25μL的体系：2×Lamp Master Mix 12.5μL、10μM的引物F3 0.5μL、10μM的引物B3 0.5μL、10μM的引物FIP 2μL、10μM的引物BIP 2μL、10μM的引物LF 1μL、10μM的引物LB 1μL、50ng模板DNA，剩下的为水。

10.根据权利要求3或4所述方法或权利要5-8中任意一项所述试剂盒，其特征在于，扩增反应的产物在日光和/或紫外下进行可视化检测；其中，在日光下进行可视化检测时，如果产物呈黄色，则判定样品中含有鲣鱼，即为阳性；在紫外下进行可视化检测时，如果产物呈现荧光色时，则判定样品中含有鲣鱼，即为阳性。