[发明专利]基于ISSR指纹图谱系统鉴别常见菜用黄麻品种的方法及其应用在审
| 申请号： | 202110776747.6 | 申请日： | 2021-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN113278727A | 公开（公告）日： | 2021-08-20 |
| 发明（设计）人： | 廖小芳;赵艳红;侯文焕;唐兴富 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 冉珊敏 |
| 地址： | 530000 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 issr 指纹 图谱 系统 鉴别 常见 黄麻 品种 方法 及其 应用 | ||
1.基于ISSR指纹图谱系统鉴别常见菜用黄麻品种的方法，其特征在于，步骤如下：
（1）提取待检测的菜用黄麻总DNA；
（2）以步骤（1）的黄麻总DNA为模板，依次以ISSR引物鉴别组中的1号、2号、3号引物为ISSR引物，进行PCR扩增；
（3）分析步骤（2）PCR扩增后的条带，根据常见菜用黄麻品种的ISSR引物鉴别组中的每条引物呈现的条带信息建立DNA指纹图谱，鉴定待测菜用黄麻的品种。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述常见菜用黄麻品种为桂麻菜1号、桂麻菜2号、桂麻菜3号、桂麻菜4号和桂麻菜5号。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中ISSR引物鉴别组中的1号、2号、3号引物分别为UBC814、UBC854和UBC872或UBC814、UBC854和UBC874或UBC814、UBC854和UBC878；UBC814序列为5'-CTCTCTCTCTCTCTCTA-3'、UBC854序列为5'-TCTCTCTCTCTCTCTCRG-3'、UBC872序列为5'- GATAGA TAGATAGATA-3'、UBC874序列为5'-CCCTCCCTCCCTCCCT-3'、UBC878序列为5'- GGATGGATGGA TGGAT-3'，其中R = (A , G)。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增程序为：94℃预变3 min，94℃ 30 s，56℃ 20 s，72℃ 20 s，扩增35个循环，最后72℃延伸3 min。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中DNA指纹图谱的构建方法为：以常见菜用黄麻品种编号和扩增谱带带型为纵列，每条谱带的位点编号为横行，在每一纵横交结处，有扩增谱带用“1”表示，没有扩增谱带用“0”表示，分别获得每条引物对不同菜用黄麻品种的ISSR指纹图谱表。
6.权利要求1-5任一项所述的方法在鉴定菜用黄麻种质资源中的应用。
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