[发明专利]一种用于蓝圆鰺源成分检测的引物和探针组合、试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 202110785623.4 | 申请日： | 2021-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN113337619B | 公开（公告）日： | 2022-12-02 |
| 发明（设计）人： | 刘立兵;王建昌;孙晓霞;付琦;王金凤;娄巧哲 | 申请（专利权）人： | 石家庄海关技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 河北国维致远知识产权代理有限公司 13137 | 代理人： | 任青 |
| 地址： | 050051 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 蓝圆鰺源 成分 检测 引物 探针 组合 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于蓝圆鰺源成分检测的引物和探针组合，其特征在于：包括引物对和探针，所述引物对的序列如下：
上游引物-F：5'-TGGCCTTCCCTCGAATGA-3'；
下游引物-R：5'-CGGCCCCGGCTTCA-3'；
所述探针-P的序列如下：5'-CTTCTGACTACTCCCTCCGTCCTTCCTGC-3'；
其中，所述探针的5'端修饰有荧光素，3'端修饰有荧光猝灭基团。
2.如权利要求1所述的用于蓝圆鰺源成分检测的引物和探针组合，其特征在于，所述探针为：5'-FAM-CTTCTGACTACTCCCTCCGTCCTTCCTGC-Eclipse-3'。
3.如权利要求1或2所述的用于蓝圆鰺源成分检测的引物和探针组合在非诊断性检测鱼肉制品中蓝圆鰺源成分中的应用。
4.一种用于蓝圆鰺源成分检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含权利要求1或2所述的用于蓝圆鰺源成分检测的引物和探针组合。
5.如权利要求4所述的用于蓝圆鰺源成分检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PerfectStart II Probe qPCR SuperMix和ddH2O。
6.利用权利要求5所述的试剂盒检测鱼肉制品中蓝圆鰺源成分的方法，其特征在于：具体操作为：提取待测物的基因组DNA为模板，用所述试剂盒进行real-time PCR扩增，扩增完成后收集荧光信号。
7.如权利要求6所述的检测鱼肉制品中蓝圆鰺源成分的方法，其特征在于：所述real-time PCR扩增的反应体系包括以下试剂及用量：2×PerfectStart II Probe qPCRSuperMix 12.5μL，上游引物和下游引物各1μL~2μL，探针1μL~2μL，DNA模板1μL，ddH2O补足至25μL；其中，所述上游引物和下游引物的浓度均为320nmol/L，所述探针的浓度为320nmol/L。
8.如权利要求6所述的检测鱼肉制品中蓝圆鰺源成分的方法，其特征在于：所述real-time PCR扩增的条件为：95℃ 30 s；95℃ 5 s；60 ℃ 35 s；40个循环。
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