[发明专利]用于扩增或检测人腺病毒DNA的引物组及其应用

权利要求书

1.用于扩增或检测人腺病毒DNA的引物组，其特征在于，包括针对Penton基因设计的第一引物对、针对Hexon基因设计的第二引物对和针对Fiber基因设计的第三引物对；

所述第一引物对包括：Penton-F如SEQ ID NO.1所示，Penton-R和如SEQ ID NO.2所示；

所述第二引物对包括：Hexon-F如SEQ ID NO.3所示，Hexon-R如SEQ ID NO.4所示；

所述第三引物对包括：Fiber-F如SEQ ID NO.5所示，Fiber-R如SEQ ID NO.6所示，Fiber-CR如SEQ ID NO.7所示。

2.如权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述引物组用于对人腺病毒进行分型，所述分型的基因型包括对B、C、D和E型人腺病毒。

3.包括权利要求1或2所述的引物组的人腺病毒DNA扩增的反应体系。

4.如权利要求3所述的反应体系，其特征在于，还包括rTaq DNA聚合酶、Mg2+和dNTPs中的至少一种。

5.利用权利要求1或2所述的引物组、或者权利要求3或4所述的反应体系进行扩增或检测人腺病毒DNA分子的方法。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，分别利用所述第一引物对、所述第二引物对和所述第三引物对进行PCR扩增；

使用所述第一引物对进行扩增反应的条件为：94℃条件下预变性2min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸80s，扩增循环次数为35～40次，72℃延伸10min；

使用所述第二引物对进行扩增反应的条件为：94℃条件下预变性2min，然后94℃变性30s，53℃退火30s，72℃延伸100s，扩增循环次数为35～40次，72℃延伸10min；

使用所述第三引物对进行扩增反应的条件为：94℃条件下预变性2min，然后94℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸60s，扩增循环次数为35～40次，72℃延伸10min。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，还包括对依据扩增反应判断待测样品中是否存在目标DNA分子的步骤；所述步骤包括：

当使用所述第一引物对进行扩增时，其扩增产物经电泳检测出现1.2kb条带时为阳性，不出现条带或者只出现片段小于100bp的引物二聚体条带时为阴性；

当使用所述第二引物对进行扩增时，其扩增产物经电泳检测出现1.6kb条带时为阳性，不出现条带或者只出现片段小于100bp的引物二聚体条带时为阴性；

当使用所述第三引物对进行扩增时，其扩增产物电泳检测出现1.0kb、1.5kb或2.0kb条带时为阳性，不出现条带或者只出现片段小于100bp的引物二聚体条带时为阴性。

8.权利要求1或2所述的引物组、或者权利要求3或4所述的反应体系在制备检测或分型人腺病毒试剂盒中的应用。

9.利用权利要求5-7任一项所述的方法对人腺病毒进行基因分型的方法。