[发明专利]一种用于副百日咳鲍特菌检测探针、试剂盒及其使用方法在审
申请号: | 202110790449.2 | 申请日: | 2021-07-13 |
公开(公告)号: | CN113373143A | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 曹现涛;陆亚平;李彬;魏光;李拼 | 申请(专利权)人: | 国药(武汉)医学实验室有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04 |
代理公司: | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人: | 魏毅宏 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 百日咳 鲍特菌 检测 探针 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种引物组合,用于扩增包括副百日咳鲍特菌基因序列的扩增片段,其特征在于,所述引物组合包括第一引物和第二引物,其中,
所述第一引物的序列为:
CAGCCCACAGGCGGAGATCGTCTATGACTT;
所述第二引物的序列为:
GGACATAGACCGTCAGCAGCGGCTGGTTGG。
2.如权利要求1所述的引物组合,其特征在于,还包括第三引物,所述第三引物的序列为:
TCCATGTCGTGGCCAAGTATGGACGAGAGGTCATTGATCGGGTGCGCGTG。
3.一种探针组合,用于副百日咳鲍特菌的核酸检测,其特征在于,包括所述第一引物、第二引物和荧光探针;所述荧光探针为经过位点修饰后的所述第三引物。
4.如权利要求3所述的探针组合,其特征在于,所述荧光探针序列为:
TCCATGTCGTGGCCAAGTATGGACGAGAGGTCA/i6FAMdT/T/idSp/A/iBHQ1dT/CGGGTGCGCGTGC3spacer。
5.一种试剂盒,用于副百日咳鲍特菌的核酸检测,其特征在于,包括扩增反应试剂,所述扩增反应试剂中包括如权利要求3所述的探针组合。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,还包括缓冲液、阳性质控品和阴性质控品。
7.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述阳性质控品为副百日咳鲍特菌的分离培养物。
8.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述阴性质控品为生理盐水。
9.一种如权利要求5所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
提取待测样本的核酸;
配制反应体系,向所述反应体系中加入所述核酸,进行MIRA扩增反应;
根据是否出现相应扩增曲线,分析待测样本中是否含有副百日咳鲍特菌核酸。
10.根据权利要求9所述试剂盒的使用方法,其特征在于,MIRA扩增反应在温度设定为39℃的荧光检测器中进行。
11.根据权利要求9所述试剂盒的使用方法,其特征在于,所述试剂盒用于口咽拭子、鼻咽拭子核酸检测。
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