[发明专利]一种靶向肥大细胞MrgX2小分子荧光探针及制备方法和应用

权利要求书

1.一种靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针，其特征在于，该探针结构式为；

其中，R代表含有羧基的荧光发色团，n代表2～5；

所述的含有羧基的荧光发色团为香豆素类荧光发色团、荧光素类荧光发色团或氟化硼二吡咯醇酸；

香豆素类荧光发色团、荧光素类荧光发色团与氟化硼二吡咯醇酸构式如下：

其中，R₁为氢原子、甲氧基或氮烷基；R₂、R₃为氯原子、溴原子或氟原子。

2.一种靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针的制备方法，其特征在于，按照氨基取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物∶荧光发色团∶丙基磷酸酐＝1∶1∶1的摩尔比，将氨基取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物、含有羧基的荧光发色团以及丙基磷酸酐加入到DCM中进行反应，得到荧光探针；该荧光探针的结构式如下：

其中，R代表含有羧基的荧光发色团，n代表2～5；

所述的含有羧基的荧光发色团为香豆素类荧光发色团、荧光素类荧光发色团或氟化硼二吡咯醇酸；

香豆素类荧光发色团、荧光素类荧光发色团与氟化硼二吡咯醇酸构式如下：

其中，R₁为氢原子、甲氧基或氮烷基；R₂、R₃为氯原子、溴原子或氟原子。

3.根据权利要求2所述的一种靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针的制备方法，其特征在于，氨基取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物通过以下过程制得：

1)将甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物溶于DDM后，加入三溴化硼，去甲基后得到(R)-4-(7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)苯酚；

2)向(R)-4-(7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)苯酚中加入叔丁基(溴乙基)氨基甲酸酯、叔丁基(溴丙基)氨基甲酸酯、叔丁基(溴丁基)氨基甲酸酯或叔丁基(溴戊基)氨基甲酸酯进行反应，得到末端为叔丁基氨基甲酸酯取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物；

3)将末端为叔丁基氨基甲酸酯取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物在盐酸中，以乙酸乙酯为溶剂，脱去氨基保护，得到氨基取代的2～5个不同碳链长度的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物。

4.根据权利要求3所述的一种靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针的制备方法，其特征在于，甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物通过以下过程制得：

1)4-甲氧基苯甲酰乙酰乙酯与3-氨基吡唑在乙酸溶液中反应，得到5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7(4H)-酮；

2)以POCl₃为氯代试剂，取代5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7(4H)-酮的羰基，得到7-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶；

3)将7-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶溶解于二氧六环，加入DIEA后与(R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷反应，得到甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶类衍生物。

5.一种如权利要求1所述的靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针在制备靶向识别肥大细胞MrgX2制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，靶向肥大细胞MrgX2受体的小分子荧光探针在用于MrgX2竞争性配体筛选中的应用。