[发明专利]一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法

说明书

本发明属于生理与生物化学技术领域，公开了一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法，包括槟榔幼苗干旱处理：将槟榔幼苗栽种于塑料盆中，放置在光照培养箱内培养，进行不浇水处理；样品的采集：分别在处理后0、2、4、6、8、10 天后收集槟榔叶片和根系样品，液氮速冻后存于冰箱储存；使用间接ELISA法对槟榔碱含量进行测定；使用水浴浸提法对脯氨酸含量进行测定；通过测定槟榔碱含量与脯氨酸含量的比值来判断槟榔幼苗的干旱状态。本发明通过测定槟榔碱含量与脯氨酸含量，并且计算二者比值，即可判断槟榔幼苗的干旱状态，只需取槟榔幼苗的微量组织，即可进行测定，测量结果相对准确，易于判断。

技术领域

本发明属于生理与生物化学技术领域，尤其涉及一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法。

背景技术

目前：槟榔(Areca catechu L.)隶属于棕榈科(Palmae)，槟榔属(Areca)，是多年生的常绿乔木。槟榔因其助消化、抗菌等重要的药用价值，被称为中国4大南药之首。原产于东南亚，在我国主要分布于台湾、海南、广西、广东、云南、福建的南部地区，是海南省第二大经济作物，槟榔产业的发展前景是十分广阔的。在海南，每年11月到第二年4月，常出现长期的连续干旱，导致了槟榔生长发育迟缓，延长了槟榔的结果期，进而严重影响了其产量。

脯氨酸作为植物体内的相容溶质和渗透保护剂，是一种小分子，具有低分子量、高溶解性等特点，在植物的有机渗透调节中起着重要作用。一方面，作为活性氧的清除剂，是改善渗透压损伤的能量来源；另一方面，稳定蛋白质和膜，还可以降低膜的渗透势，防止细胞内脱水。它们聚集在细胞内，维持细胞周围和胞浆之间渗透差异的平衡。因此，测定脯氨酸的含量常可以作为诊断干旱状态的方法。但直至现在，还未见关于槟榔碱在渗透调节中所起的作用的报道。

目前，对于脯氨酸含量的测定，通常的检测方法包括分光光度法、高效液相色谱法、电位滴定法、薄层扫描法、示波极谱法等。其中，高效液相色谱法、薄层扫描法等方法灵敏度高、准确性好，但是测量成本高，所需仪器设备昂贵，操作繁琐。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

现有技术中，测量成本高，仪器设备昂贵，操作繁琐。

方法单一，大多仅通过测量脯氨酸含量、SOD酶活性、电导率、丙二醛(MDA)含量来判断槟榔的干旱状态。

解决以上问题及缺陷的难度为：相关文献报道较少，在农业实际生产中应用较少。

解决以上问题及缺陷的意义为：丰富了检测槟榔幼苗干旱状态的方法；极大地改善农业生产，解决农业生产上的技术难题，解决大规模槟榔幼苗干旱的防治问题。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法。

本发明是这样实现的，一种通过槟榔碱与脯氨酸含量检测槟榔幼苗干旱状态的方法包括：

步骤一，槟榔幼苗干旱处理：将槟榔幼苗栽种于塑料盆中，放置在光照培养箱内，进行约一周的适应性培养，进行不浇水处理，持续干旱10天；

步骤二，样品的采集：分别在处理后0、2、4、6、8、10天后收集槟榔叶片和根系样品，液氮速冻后存于冰箱储存；

步骤三，槟榔碱含量的测定：使用间接ELISA法对槟榔碱含量进行测定；

步骤四，脯氨酸含量的测定：使用水浴浸提法对脯氨酸含量进行测定；

步骤五，槟榔幼苗干旱状态的判断：通过测定槟榔碱含量与脯氨酸含量的比值来判断槟榔幼苗的干旱状态。

进一步，步骤一中，选取长势一致的1-2叶龄槟榔幼苗，所述槟榔幼苗每周浇一次1/2Hoagland营养液，所述Hoagland营养液的pH＝6.0。