[发明专利]用于检测胸苷激酶1的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于检测胸苷激酶1的试剂盒，其特征在于，包括用于特异性识别胸苷激酶1的胸苷激酶1(TK1)第二抗体，所述胸苷激酶1第二抗体标记有信号放大标记物，所述信号放大标记物包括小分子发光标记物以及偶联于小分子发光标记物的聚合物，所述聚合物和所述胸苷激酶1第二抗体相连接。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述小分子发光标记物包括吖啶酯和异鲁米诺中的至少一种；

优选的，所述聚合物包括聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氨基酸和生物大分子中的至少一种；

优选的，所述聚氨基酸为聚赖氨酸；

优选的，所述生物大分子为牛血清白蛋白或血蓝蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，还包括:固定或欲固定至载体的胸苷激酶1第一抗体，TK1第一抗体、TK1第二抗体分别通过识别不同的特异性表位和胸苷激酶1特异性结合；

优选的，所述TK1第一抗体识别的特异性表位包括：Seq ID No.1所示的氨基酸序列，所述TK1第二抗体识别的特异性表位包括：Seq ID No.2所示的氨基酸序列；Seq ID No.1:5’-DRNTMEALPACL-3’，Seq ID No.2:5’-VVKLTAVCMECF-3’；

优选的，所述第一抗体和第二抗体为重组抗体。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述载体为磁微粒，磁微粒表面经过活性基团修饰，所述第一抗体和所述活性基团相连接；

优选的，所述活性基团包括羧基、氨基、醛基、亲和素中的至少一种。

5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，还包括：胸苷激酶1校准品和胸苷激酶1质控品，所述胸苷激酶1校准品和胸苷激酶1质控品包括TK1重组抗原，所述TK1重组抗原包含Seq ID No.1所示的氨基酸序列以及Seq ID No.2所示的氨基酸序列；

优选的，所述胸苷激酶1校准品中TK1重组抗原的浓度范围包括0.0pM～300.0pM；

优选的，所述胸苷激酶1质控品中TK1重组抗原的浓度包括20.0pM和80.0pM。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括：使得小分子发光标记物发光的激发试剂，所述激发试剂包括预激发液和激发液；

优选的，所述预激发液包括酸性双氧水溶液，所述激发液包括强碱溶液。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：稀释液；

优选的，所述稀释液为PBS缓冲液。

8.根据权利要求1-7任一项所述的试剂盒在检测胸苷激酶1中的应用。

9.一种用于检测细胞异常增殖的方法，包括：

利用权利要求1-7任一项所述的试剂盒测定受试者待测样本和胸苷激酶1校准品的信号强度；

根据胸苷激酶1校准品中不同浓度的TK1重组抗原的信号强度建立标准曲线；

根据待测样本的信号强度和标准曲线计算待测样本中胸苷激酶1的含量；

以及基于所述胸苷激酶1的含量评价所述受试者的细胞增殖是否异常。

10.一种如权利要求1-7任一项所述的试剂盒的制备方法，包括：

将活化的小分子发光标记物和聚合物反应得到信号放大标记物；

对信号放大标记物进行活化，以和TK1第二抗体反应，得到信号放大标记物标记的TK1第二抗体。