[发明专利]一种诱导荔枝霜疫霉菌孢子囊释放游动孢子的方法

权利要求书

1.一种诱导荔枝霜疫霉菌（Peronophythora litchi）孢子囊释放游动孢子的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）荔枝霜疫霉菌孢子囊的产生：将荔枝霜疫霉菌块接种于装有培养液的培养皿中，在黑暗条件下培养4~6d，再置于光照700~900lux、温度23~30℃下连续培养1~3d，产生荔枝霜疫霉菌孢子囊；

培养液包括以下重量份原料：V8蔬菜汁8~15份、防风草根汁1~6份、荔枝果皮多酚2~10份、二裂酵母发酵产物溶孢物0.3~1.2份、琼脂粉3~8份、去离子水80~100份；

（2）游动孢子囊的诱导产生：待步骤（1）中的培养皿产满菌丝后，将无菌玻棒涂抹长满菌丝的平板，再置于20~30℃中光照静置培养20~30h，即可诱导产生游动孢子囊；

（3）游动孢子集中释放：在步骤（2）的培养皿加入无菌水，收集荔枝霜疫霉菌孢子囊，并移至10~20℃培养箱中静置40~60min，即可释放出游动孢子；

（4）游动孢子的收集：用灭菌后的毛笔刷洗步骤（3）得到的培养皿表面的菌丝，过滤，所得到的过滤液即为荔枝霜疫霉菌游动孢子悬浮液。

2.如权利要求1所述的诱导荔枝霜疫霉菌孢子囊释放游动孢子的方法，其特征在于：所述步骤（1）中培养液包括以下重量份原料：V8蔬菜汁10份、防风草根汁3份、荔枝果皮多酚6份、二裂酵母发酵产物溶孢物0.7份、琼脂粉5份、去离子水90份。

3.如权利要求1所述的诱导荔枝霜疫霉菌孢子囊释放游动孢子的方法，其特征在于：所述培养液的制备方法为将V8蔬菜汁、防风草根汁、荔枝果皮多酚、二裂酵母发酵产物溶孢物、琼脂粉、去离子水混合搅拌5~30min，再于100~130℃高压蒸汽灭菌10~30 min。

4.如权利要求1所述的诱导荔枝霜疫霉菌孢子囊释放游动孢子的方法，其特征在于：所述步骤（2）中光照为700~900lux。

5.如权利要求1所述的诱导荔枝霜疫霉菌孢子囊释放游动孢子的方法，其特征在于：所述步骤（4）中使用双层无菌纱布过滤，过滤1~3次。