[发明专利]空间邻近化学发光法检测D-二聚体的试剂盒的应用

说明书

本发明涉及一种空间邻近化学发光法检测D‑二聚体的试剂盒的应用。试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，校准品包括不同浓度D‑Dimer抗原的校准品和0.1M磷酸盐稀释液；酶标记物的组分包括过氧化物酶标记的D‑Dimer检测抗体和0.05M磷酸盐缓冲液；发光标记物的组分包括9,10‑二氢吖啶标记的D‑Dimer捕获抗体和0.05M Tris缓冲液；辅助剂的组分包括发光辅助剂和枸橼酸盐缓冲液；触发剂选用0.05M Tris缓冲液。本发明提供的检测方法作为一种真正意义上的均相化学发光技术，无需载体，没有包被、洗涤过程，试剂盒组分少，且灵敏度高、重复性好、操作简单。

本申请是申请日为2018年09月25日、申请号为201811115058.5、发明名称为《空间邻近化学发光法检测D-二聚体的试剂盒及其检测方法》的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种空间邻近化学发光法检测D-二聚体的试剂盒的应用。

背景技术

D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白的降解产物，其形成机理为：纤维蛋白原在凝血酶的作用下，从α链及β链依次脱去多肽A和多肽B，形成纤维蛋白Ⅰ和纤维蛋白Ⅱ，纤维蛋白在因子XII的作用下交联在血管壁上，并被活化的纤溶酶裂解而产生各种FDP碎片。由于γ链的交联，便产生了包含γ链相连的2个D片段，即D-二聚体，它的分子量约为18万道尔顿，体内半衰期为8h。

D-二聚体是特异性反映体内继发性纤溶性亢进的标志物之一，多种疾病均可引起D-二聚体的升高。研究资料表明：血浆中D-二聚体的水平与心血管疾病密切相关，心血管疾病血浆D-二聚体含量阳性率的高低依次为主动脉夹层、急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、稳定型心绞痛、先天性心脏病、心律失常，表明病情越危机，D-二聚体上升幅度越大，阳性率越高。其中主动脉夹层阳性率达100％，D-二聚体的检测对其具有非常好的阴性预期值，因此其对于主动脉夹层的排除诊断有较高的应用价值。

深静脉血栓(DVT)形成是肺栓塞的主要易患因素，大约51％～71％的肺栓塞的血栓栓子来源于DVT。DVT的发现虽不能直接诊断肺栓塞，但却能给予很大的提示。通过静脉造影、超声多普勒血管检查以及肢体阻抗容积图等检查有助于诊断DVT，而目前许多研究表明血浆D-二聚体含量检测也是DVT筛查的一种有效手段。研究发现静脉造影证实为DVT的患者血浆D-二聚体水平均升高，若采用以D-二聚体500ng/mL为阳性，则检查的敏感性和特异性分别为95％和77％，阴性预测值为92％。因此，临床上怀疑DVT患者若D-二聚体检测结果正常，则有助于排除VT的诊断。

在抗凝及溶栓治疗方面，D-二聚体还具有一定指导意义，可作为继发性纤溶亢进的标志，观察肝素抗凝效果及血栓溶解情况。溶栓治疗后，4～8h可见D-二聚体水平明显增高，这与大量新鲜血栓溶解有直接关系，之后可见逐渐降低，并于24h～7d维持至正常水平。这说明此时的治疗并无明显效果，血栓大小变化不大，若出现降低后再次增高现象，则表明再次形成血栓，陈旧性血栓患者不会出现D-二聚体水平上升现象，若异常增高则说明存在新的血栓形成。在脑梗死急性期溶栓治疗中，随着血栓溶解，血浆中D-二聚体含量急剧上升，当血栓完全溶解，血管再通后，其含量迅速下降。如持续较高的水平不降，提示血栓未完全溶解或有继发性血栓形成，因而在脑梗死治疗，尤其在溶栓治疗中，动态检测D-二聚体含量对脑梗死诊断、疗效观察及预后有重要临床意义。

D-二聚体是交联纤维蛋白的特异性降解产物，是血栓形成和溶解的标志物。它的生成和增高表明体内存在高凝状态，血栓形成和继发纤溶性增强。有文献报道：AMI的血栓形成率最高，SAP血栓发生率最低，UAP血栓形成率介于AMI和SAP之间。因此，测定D-二聚体对于冠心病的临床分型有一定的参考价值。