[发明专利]黄酮苷类化合物用于抗烟草花叶病毒的应用及其制备方法

权利要求书

1.黄酮苷类化合物用于抗烟草花叶病毒的应用，所述黄酮苷类化合物为化合物I、化合物II、化合物III中的任一种，

化合物I化合物II化合物III。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述黄酮苷类化合物作为烟草花叶病毒防控剂或抗烟草花叶病毒免疫诱抗剂。

3.权利要求1或2所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，采集新鲜毛蕊铁线莲，干燥、粉碎，粉碎物用溶剂冷浸提取，所述溶剂为乙醇或甲醇，每4~7天更换一次溶剂，共提取3~4次，提取液合并浓缩，得到提取物；

步骤2，将提取物分散于水中，调制呈混悬状态，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；

步骤3，所述乙酸乙酯萃取物进行正相梯度洗脱，洗脱剂包括二氯甲烷和甲醇，其中，二氯甲烷和甲醇的体积比为100：1~1：1，获得馏分1；

所述正丁醇萃取物通过正相柱层析，洗脱剂包括二氯甲烷、甲醇和水，所述二氯甲烷、甲醇、水的体积比为100：1：0~1：1：0.5，得馏分3；

步骤4，馏分1通过正相柱层析，洗脱剂依次为石油醚和二氯甲烷，最终得馏分2；

步骤5，对馏分2和馏分3分别进行凝胶柱层析，洗脱剂包括二氯甲烷和甲醇，二氯甲烷和甲醇的体积比为1：1；馏分2对应得到化合物I和化合物II，馏分3对应得到化合物III。

4.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤1中冷浸提取时毛蕊铁线莲的粉碎物与甲醇或乙醇的体积比为1：2~1：3。

5.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，粉碎后的毛蕊铁线莲过30~50目筛，得到粉碎物。

6.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，萃取过程具体为：先用石油醚萃取2~3次，再将石油醚萃取后的下层液用乙酸乙酯萃取3~4次，最后将乙酸乙酯萃取后的下层液用正丁醇萃取3~5次。

7.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的体积与分散于水中的提取物的体积比均为1:1。

8.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤3中正相梯度洗脱采用普通硅胶或Diol填料。

9.如权利要求3所述的黄酮苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤5中凝胶柱层析采用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20填料。