[发明专利]一种检测沙门氏菌的试纸条及其制备方法

说明书

本申请属于沙门氏菌检测技术领域，尤其涉及一种检测沙门氏菌的试纸条及其制备方法。本申请提供了一种检测沙门氏菌的试纸条的制备方法，包括：底板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；顺着待测样品的层析方向，样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次部分重叠相互连接，样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫设置在底板的表面；胶体金垫喷涂有胶体金标记的沙门氏菌多克隆抗体；硝酸纤维素膜上设有包被了灭活的沙门氏菌抗原的检测线，以及包被了鼠抗兔二抗或羊抗兔二抗的质控线；检测线靠近胶体金垫，质控线靠近吸水垫。本申请提供的试纸条，为一种快速、灵敏，操作简单的现场检测食源性沙门氏菌的产品。

技术领域

本申请属于沙门氏菌检测技术领域，尤其涉及一种检测沙门氏菌的试纸条及其制备方法。

背景技术

食源性病原体已成为重要的食品安全问题。在所有这些食源性病原体中，沙门氏菌是无论是在发展中国家还是发达国家中，都是人和动物宿主中食源性疾病暴发的主要原因。随着生活水平的提高，消费者越来越关注其饮食的食品安全性和营养品质。因此有必要对食物中可能存在的沙门氏菌进行及时有效的检测，以防止食物中毒。

食源性沙门氏菌一般由受污染食物进入人体，通过侵染小肠上皮细胞，再利用自身携带的多种毒力因子作用导致人罹患沙门氏菌病。沙门氏菌在胃肠道内会面临一系列对其生长和生存不利的逆境条件，如胃酸、高渗透压、高浓度胆盐、金属离子、营养限制和肠道菌群的竞争作用。然而，沙门氏菌能够通过调节自身基因的表达来应对这些逆境，进一步黏附、定殖和入侵宿主细胞，最终导致人患病。

检测食源性沙门氏菌的常用方法包括基于培养的方法，聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)。这些方法有些需要3到5天才能获得结果，有些需要训练有素的技术人员和复杂的DNA提取程序，或者缺乏足够的敏感性。此外，基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)也用于分析食源性病原体。但是这种方法需要大型设备和高素质的技术人员。因此，开发快速，灵敏，操作简单和现场检测食源性病原体的方法至关重要。

发明内容

基于此，本申请提供了一种检测沙门氏菌的试纸条及其制备方法，为一种快速、灵敏，操作简单的现场检测食源性沙门氏菌的产品。

本申请第一方面提供了一种检测沙门氏菌的试纸条的制备方法，包括：

底板、样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；

顺着待测样品的层析方向，所述样品垫、所述胶体金垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水垫依次部分重叠相互连接，所述样品垫、所述胶体金垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水垫设置在所述底板的表面；

所述胶体金垫喷涂有胶体金标记的沙门氏菌多克隆抗体；

所述硝酸纤维素膜上设有包被了灭活的沙门氏菌抗原的检测线，以及包被了鼠抗兔二抗或羊抗兔二抗的质控线；所述检测线靠近所述胶体金垫，所述质控线靠近吸水垫。

另一实施例中，所述沙门氏菌多克隆抗体的制备方法包括：将灭活的沙门氏菌与弗氏完全佐剂混合制成疫苗，将所述疫苗间隔免疫实验兔，采集所述实验兔的血清并从所述血清中提取和纯化沙门氏菌多克隆抗体，制得所述沙门氏菌多克隆抗体。

另一实施例中，所述胶体金标记的沙门氏菌多克隆抗体的制备方法包括：将胶体金、所述沙门氏菌多克隆抗体、复溶液和碳酸钾混合反应，然后加入BSA封闭液，最后离心去除上清，得到的沉淀与所述复溶液混合，制得胶体金标记的沙门氏菌多克隆抗体；

其中，每1mL胶体金加入10～40μL2mg/mL所述沙门氏菌多克隆抗体、20μL所述复溶液以及2μL 0.2M所述碳酸钾；