[发明专利]链霉菌HL-66、其发酵产物、菌剂及用途有效
申请号: | 202110797798.7 | 申请日: | 2021-07-14 |
公开(公告)号: | CN113373093B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 韩立荣;孙宇波;吴皓;唐诗琪;谷丽花;田向荣 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学;渭南东旺农华生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C08B37/00;A01N63/28;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/465 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉菌 hl 66 发酵 产物 用途 | ||
1.链霉菌(
2.权利要求1所述链霉菌HL-66的发酵产物,其特征在于,所述发酵产物为链霉多聚糖A,其制备方法包括以下步骤:
S1、将所述链霉菌HL-66的孢子接种于种子培养基,25-26℃培养3-5天,既得菌种;将菌种按接种量3%-9%接种于发酵培养基中发酵,28-30℃下培养5-6天,收集发酵液;
S2、发酵液经固液分离获得上清液,上清液浓缩冻干,将冻干物加入水溶解,沸水提取3-5小时,过滤除杂,浓缩,加入4-20倍体积的无水乙醇,搅拌、沉淀过夜、抽滤,得到沉淀物;
S3、将沉淀物重新用水溶解,加入Sevag试剂,震荡、静置、离心、除蛋白,流水透析得粗多糖;
S4、使用DEAE Sepharose Fast Flow对粗多糖进行极性分离,调整流速为5mL/min,蒸馏水平衡2h;上清液上样,通过全自动凝胶纯化系统进行纯化,结合示差检测器在线检测收集160-190min组分,得到链霉多聚糖A。
3.根据权利要求2所述链霉菌HL-66的发酵产物,其特征在于,每升的种子培养基中含有:酵母提取物3-5g,葡萄糖3-5g,K2HPO4 3-5g,KH2PO4 0.4-0.6 g,NaCl 0.9-1.1g,微量盐溶液1-1.2mL,pH7.5。
4.根据权利要求3所述链霉菌HL-66的发酵产物,其特征在于,每升的发酵培养基中含有:葡萄糖20-22g,微量盐溶液5-6mL,pH7.2-7.6。
5.根据权利要求4所述链霉菌HL-66的发酵产物,其特征在于,每升的微量盐溶液中含有:CuCl2 0.0004-0.0005g ,FeSO4 0.0004-0.0005g,ZnCl2 0.0004-0.0005g,MnCl2·4H2O0.0004-0.0005g,CaCl2 0.0004-0.0005g。
6.以权利要求5所述链霉菌HL-66的发酵产物为有效成分的菌剂。
7.权利要求6所述菌剂在制备提高植物自身抗病性的产品中的用途。
8.根据权利要求7所述菌剂在制备提高植物自身抗病性的产品中的用途,其特征在于,所述抗病是指抗真菌病害和抗病毒性病害,真菌病害包括:番茄灰霉病、黄瓜枯萎病、马铃薯晚疫病、油菜菌核病、苹果腐烂病、烟草赤星病和烟草黑胫病;病毒病害包括:烟草花叶病毒病、黄瓜花叶病毒病、番茄黄化曲叶病毒病和小麦黄矮病毒病。
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