[发明专利]基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法及应用

权利要求书

1.一种基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，

通过对微生物的目标片段进行三核苷酸和单核苷酸循环的测序反应，得到测序图谱，根据测序图谱绘制比色带，通过分析比色带或/和测序图谱确定微生物种类；

所述三核苷酸为dATPαS、dCTP、dTTP、dGTP中的任意三种核苷酸；

所述单核苷酸为不包括在三核苷酸中的另一核苷酸。

2.根据权利要求1所述的基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)提取微生物的DNA模板，并在聚合酶的作用下PCR扩增部分可变区；

(2)将扩增产物与测序引物结合；

(3)交替循环加入三核苷酸和单核苷酸进行焦磷酸测序，得到测序图谱；

(4)根据测序图谱绘制比色带；

(5)由比色带或/和测序图谱分析微生物种群。

3.根据权利要求1所述的基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，所述测序图谱包括由核苷酸数目、核苷酸种类、信号强度以及三核苷酸和单核苷酸的位置排布构成的全部信息。

4.根据权利要求1所述的基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，所述测序图谱的分析方法包括：

通过分析单核苷酸的位点确定微生物的种类。

5.根据权利要求1所述的基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，所述比色带包括依次设置的若干单元，一单元对应一核苷酸位点；所述三核苷酸所占单元位标记为区域A，所述单核苷酸所占单元位标记为区域B。

6.根据权利要求5所述的基于核苷酸合成测序图谱的微生物种群鉴定方法，其特征在于，比色带的分析方法包括：

将微生物的比色带与相似比色带叠加设置，根据重合程度确定微生物种类。

7.一种基于核苷酸测序图谱的微生物种群鉴定方法的应用，其特征在于，权利要求1-6任一项所述的微生物种群鉴定方法应用于定向突变位点的测序。