[发明专利]一种可食用鱼精DNA的提取方法

说明书

本发明提供了一种可食用鱼精DNA的提取方法，该方法包括：使用缓冲溶液清洗鱼精原料；将经过处理后的鱼精原料投入缓冲溶液中匀浆、离心，得到接近肤色的沉淀；用浓盐溶液溶解获得的沉淀物形成溶液；用碱性溶液调节溶液pH至9~11，然后离心得到上清液；用酸性溶液将上清液pH调至6.0~7.0，获得含DNA的上清液；用浓度为50~100%乙醇沉淀得到鱼精DNA沉淀；用无菌去离子水溶解鱼精DNA沉淀，并进行纯化，即可。本发明提供的鱼精DNA提取方法规避了其他方法中有毒有害试剂的使用，获得的鱼精DNA安全可食用，纯度高，且有较高回收率，能够规模化提取生产，更适合用于动物及临床研究，丰富了鱼精DNA的应用范围。

技术领域

本发明涉及食品、海洋生物与医药相结合的技术领域，具体涉及提取可食用鱼精DNA的方法。

背景技术

在我国人口老龄化趋势的日益严重，以及有限医疗资源难以满足日益增加的医疗需求的背景下，加强病前干预以及家庭护理迫在眉睫，精准医疗、精准营养也提上日程。而核酸类物质是构成遗传信息的物质基础，是精准医疗、精准营养的重要研究内容。据报道，膳食核酸的生理功能主要有：促进生长发育；调节肝功能；抗氧化；缓解体力疲劳；辅助改善记忆，其在化妆品、食品、保健品等方面都有着广泛的应用。

膳食核酸中RNA在大多数食物中的含量占比大，而DNA一般在富含精子的物质中含量比较丰富，例如鱼精和花粉。现有的DNA产品以鱼精DNA和小牛胸腺DNA为主，在加工中被当作废料的鱼精巢中含有丰富的DNA，且鱼精DNA已被证实具有保养皮肤、治疗贫血等功能，所以从鱼精巢中有效提取DNA的方法非常重要。

但是对现有鱼精DNA的提取方法进行研究发现，提取过程多涉及有毒有害试剂的使用，阻碍了其在食品、保健品、化妆品等领域中的应用。王建（从海鱼鱼白中提取核酸，无锡轻工大学学报(食品与生物技术)，2003年第2期71-74页）、唐孝礼（鱼精DNA的快速无污染提取工艺，广州化工，1996年第24卷第4期）、刘润芝（从鲤鱼精巢中提取脱氧核糖核酸(DNA)的研究，湖南师范大学自然科学学报，1988年第11卷第3期）等人所述鱼精DNA提取率为6-25%，但实验中均使用了十二烷基硫酸钠（SDS）使蛋白质变性。专利CN110760509A利用不同截留分子量的滤膜，同时获得了河豚鱼精DNA和鱼精蛋白，但其未对所得DNA进行纯度及回收率分析。

综上所述，现有方法大多使用酚仿或SDS等变性剂，不符合绿色加工、节能减排的趋势，如何能尽量避免有毒有害试剂的使用，获得条带完整、纯度高、可食用的鱼精DNA，还需要新的更加健康的提取方法。

发明内容

本发明的目的是一种可食用鱼精DNA的提取方法，以弥补现有技术的不足。

为达到上述目的，本发明采取的具体技术方案为：

一种可食用鱼精DNA的提取方法，该方法包括以下步骤：

（1）使用缓冲溶液清洗鱼精原料；

（2）将经过（1）处理后的鱼精原料投入缓冲溶液中匀浆、离心，得到接近肤色的沉淀；

（3）用浓盐溶液溶解（2）中获得的沉淀物形成溶液；

（4）用碱性溶液调节（3）中溶液pH至9-11，然后离心得到上清液；

（5）用酸性溶液将（4）中上清液pH调至6-7，获得含DNA的上清液；

（6）用浓度为50-100%乙醇沉淀得到鱼精DNA沉淀；

（7）用无菌去离子水溶解（6）中的鱼精DNA沉淀，并进行纯化，即可。

进一步的，所述鱼类可以选择为生活中较易获取的海鱼-明太鱼。

进一步的，所述步骤（1）中所用的缓冲溶液为SSC溶液，具体为0.05-1 M氯化钠和0.01-0.1 M柠檬酸钠（14: 5, c/c）混合液。