[发明专利]干细胞细胞因子的制备方法及其在制备药物或化妆品中的用途有效

专利信息
申请号: 202110805528.6 申请日: 2021-07-16
公开(公告)号: CN113384517B 公开(公告)日: 2021-12-31
发明(设计)人: 韩之海;张涛;陈博 申请(专利权)人: 上海汉氏方舟生物科技有限公司
主分类号: A61K8/99 分类号: A61K8/99;A61K8/64;A61Q19/02;C07K14/52;C07K16/40;C12N5/071
代理公司: 广州天河万研知识产权代理事务所(普通合伙) 44418 代理人: 刘强;陈轩
地址: 200949 上海市宝*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 干细胞 细胞因子 制备 方法 及其 药物 化妆品 中的 用途
【权利要求书】:

1.细胞因子和单克隆抗体在制备抑制黑色素瘤的药物组合物中的用途;其中,细胞因子是采用如下方法制备:将表皮干细胞置于细胞培养基进行传代培养,细胞培养基为89%DMEM+10%FBS+1%双抗的干细胞培养基,培养条件为37℃,5%CO2培养;取生长良好的干细胞,调整细胞浓度为1X106/mL接种于6孔板,待细胞贴壁后使用添加了50ng·mL- 1促分泌肽的完全培养基进行换液,所述促分泌肽序列如SEQ ID NO:1所示;培养48 h,其中培养是在3%O2+5%CO2+92%N2条件下进行,收集细胞上清液,将上清液用1KD 超滤膜超滤,去除分子量1000 以下的小分子杂质,收集截留液即获得细胞因子;

所述单克隆抗体为特异性抑制酪氨酸酶的单抗:所述抗体的轻链可变区和重链可变区分别如下所示:

轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示:

DIVITQRPALMAASPGEKVTITCWYAMSGLTMREQWYQQKSGISPKPWIYDDETMHCGVPARFSGSGSGTSYSLTITSMEAEDAATYYCPHISMFDRDFGAGTKLELK;

重链可变区序列如SEQ ID NO:3所示:

EVQLEESATELARPGASVKLSCKASGYIFSSVCPKWIKQRPGQGLEWIGWSITECSYEKSLRWQAGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCAGKLHHFSGWGLGTTLAVSS。

2.如权利要求1所述的用途,其特征在于所述药物组合物中进一步的含有至少一种药学上可接受的载体。

3.如权利要求1所述的用途,其特征在于所述药物组合物中还包含赋形剂。

4.细胞因子和单克隆抗体在制备美白化妆品的用途;所述化妆品中含有细胞因子和单克隆抗体,其中,细胞因子是采用如下方法制备:将表皮干细胞置于细胞培养基进行传代培养,细胞培养基为89%DMEM+10%FBS+1%双抗的干细胞培养基,培养条件为37℃,5%CO2培养;取生长良好的干细胞,调整细胞浓度为1X106/mL接种于6孔板,待细胞贴壁后使用添加了50ng·mL- 1促分泌肽的完全培养基进行换液,所述促分泌肽序列如SEQ ID NO:1所示;培养48 h,其中培养是在3%O2+5%CO2+92%N2条件下进行,收集细胞上清液,将上清液用1KD 超滤膜超滤,去除分子量1000 以下的小分子杂质,收集截留液即获得细胞因子;

所述单克隆抗体为特异性抑制酪氨酸酶的单抗:所述抗体的轻链可变区和重链可变区分别如下所示:

轻链可变区序列如SEQ ID NO:2所示:

DIVITQRPALMAASPGEKVTITCWYAMSGLTMREQWYQQKSGISPKPWIYDDETMHCGVPARFSGSGSGTSYSLTITSMEAEDAATYYCPHISMFDRDFGAGTKLELK;

重链可变区序列如SEQ ID NO:3所示:

EVQLEESATELARPGASVKLSCKASGYIFSSVCPKWIKQRPGQGLEWIGWSITECSYEKSLRWQAGKATLTADKSSSTAYMQLSSLASEDSAVYYCAGKLHHFSGWGLGTTLAVSS。

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