[发明专利]干细胞细胞因子的制备方法及其在制备药物或化妆品中的用途

说明书

本发明涉及干细胞细胞因子的制备方法及其在制备药物或化妆品中的用途。本发明提供了表皮干细胞高表达细胞因子的方法以及制备获得了特异性抑制酪氨酸酶的单克隆抗体，所述细胞因子能够促进成纤维细胞的增殖有利于皮肤的修复，所述单抗能够抑制黑色素瘤细胞的增殖，同时细胞因子和单抗一起能够降低黑色素的分泌，具有较好的美白应用效果。

技术领域

本发明涉及生物领域，具体的涉及干细胞细胞因子的制备方法及其在制备药物或化妆品中的用途。

背景技术

细胞因子是指一类由免疫细胞和相关细胞产生、分泌的高活性多功能小分子蛋白，不包括免疫球蛋白、补体和一般生理性细胞产物，具有很高的免疫调节活性。目前已发现的细胞因子已有百余种，主要包括干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子、表皮生长因子、转化生长因子、神经生长因子等。细胞因子在机体免疫应答、抗病毒、抗肿瘤及炎症反应中发挥着重要作用，其不仅在疾病治疗上起着重要作用，而且是抵抗感染必不可少的物质。

细胞因子在人体内含量极少，但生物活性极高，具有很多重要的生物学效应和生理功能。它们与皮肤细胞的生长、分裂、分化、增殖和迁移有关，可以有效地与皮肤细胞发生作用，发挥突出的美容护肤功效。现有技术中已经研究了EGF(表皮生长因子)、aFGF(酸性成纤维细胞生长因子)、bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)、KGF(角质细胞生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)等细胞因子在美容化妆品中的应用。

EGF在体内能促进机体表皮细胞、上皮细胞、成纤维细胞的生长、分裂和新陈代谢，促进微血管的生长，改善细胞生长的微环境。因此它对受损皮肤、敏感皮肤、创伤皮肤以及改建性皮肤具有良好的修复、护理作用，特别是对目前美容院中流行的换肤术后局部受损皮肤的修复，还能预防术后并发症的发生。EGF还能刺激肉芽组织的形成和促进肉芽组织的上皮化，还可调节胶原降解及更新，使胶原纤维以线性方式排列，防止结缔组织异常增生，故而有缩短创伤愈合时间以及减少疤痕形成的作用，对防止和护理痤疮也有很好的效果。aFGF是一种作用极强的有丝分裂原，对来源于中胚层和神经外胚层的多种细胞具有促进分裂的作用，可用于创伤、烧伤、溃疡等的治疗。bFGF在美容中的作用可以表现在以下几个方面：1).护肤、修复作用。bFGF能够改善细胞生长的微环境，促进弹性纤维和胶原蛋白的合成，使肌肤富有弹性，使皮肤处于滑嫩的状态。2).抗皱、防衰老作用。能够促进成纤维细胞的生长发育，不断以新的细胞取代老化细胞，因此产生防皱、祛皱作用。

已有研究也分离制备了细胞因子。比如CN105543313B公开了一种分离纯化人源间充质干细胞因子的方法，它包括如下步骤：a、细胞培养上清液的获取：取人间充质干细胞，置于间充质干细胞无血清培养基中培养，当细胞生长到汇合度75～85％时，收集上清液；b、过滤浓缩：对步骤a的上清液先采用0.22μm滤膜过滤；然后通过50KD超滤膜，收集透析液，再将透析液通过1KD超滤膜，收集截留液，得到细胞因子浓缩液。CN106701672B公开人源脂肪间充质干细胞因子的培养方法，它包括如下步骤：取人脂肪间充质干细胞，置于高辅酶无血清培养基中，培养至细胞汇合度75～85％时，收集上清液即得。

但是现有技术分离制备细胞因子的方法还不够多，制备较好的含有所述细胞因子的化妆品种类还不够多。

发明内容

本发明针对现有技术提供了技术改进，提供了一种优化的细胞因子的制备方法。