[发明专利]一种用于提取西红柿中过敏原的提取液及提取方法

权利要求书

1.一种用于提取西红柿中过敏原的提取液，其特征在于，所述提取液包括以下原料组分：pH值为7.0～8.0的PBS缓冲液、0.5～1.5mM的EDTA、3～8mM的L-半胱氨酸、0.5～2mM蛋白酶抑制剂、占所述提取液的总质量的0.05％～0.2％的果胶酶。

2.根据权利要求1所述的提取液，其特征在于，所述提取液包括以下原料组分：pH值为7.2～7.8的PBS缓冲液、0.8～1.2mM的EDTA、4～6mM的L-半胱氨酸、0.8～1.2mM蛋白酶抑制剂、占所述提取液的总质量的0.08％～0.15％的果胶酶。

3.根据权利要求1或2所述的提取液，其特征在于，所述的PBS缓冲液的浓度为0.008～0.02mM，pH值为7.3～7.5；所述蛋白酶抑制剂为苯甲基磺酰氟。

4.一种西红柿过敏原的提取方法，其特征在于，所述提取方法采用权利要求1至3中任一项所述的提取液。

5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：

(1)、将西红柿匀浆使用丙酮抽提2～4次，收集果肉残渣；

(2)、将步骤(1)中所得果肉残渣干燥得到西红柿干粉；

(3)、采用权利要求1至3中任一项所述的提取液对步骤(2)中所得西红柿干粉进行过敏原提取，提取结束后收集上清液；

(4)、步骤(3)中所得上清液经过滤、浓缩得到西红柿过敏原。

6.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法还包括采用Bradford试剂盒测定步骤(4)中所得西红柿过敏原的浓度；采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对步骤(4)中所得西红柿过敏原进行组分分析鉴定。

7.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)具体为：将所述西红柿匀浆加入丙酮中，于0℃～6℃下搅拌浸提0.3～1h，抽滤去除上层有机相，重复丙酮抽提2～4次，收集果肉残渣；

所述丙酮的总体积为所述西红柿匀浆体积的2.5～5倍；所述丙酮在-30℃～-10℃下预冷。

8.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)具体为：将步骤(2)所得西红柿干粉加入所述提取液中，于0～4℃下搅拌提取4～10h，离心收集上清液。

9.根据权利要求5所述的提取方法，其特征在于，步骤(4)中所述过滤具体为将所述上清液首先通过0.45μm滤膜，然后通过0.22μm滤膜；所述浓缩采用超滤浓缩，使用的超滤管截留分子量为2500～4000Da，离心条件为3000～5000r、0～4℃。

10.采用权利要求4至9中任一项所述的提取方法制备的西红柿过敏原在制备过敏原检测试剂中的应用。