[发明专利]贝母类药材的特征图谱构建方法及其应用

权利要求书

1.贝母类药材的特征图谱构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1，制备供试品溶液：将贝母类药材粉碎，称取药材粉末，加入氨溶液碱化，再加入二氯甲烷-甲醇混合溶液，称定重量后进行超声处理，再次称定重量，加二氯甲烷-甲醇混合溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液用氮气吹干溶剂，残渣加入甲醇复溶，经0.22μm滤膜过滤，续滤液即为供试品溶液；

步骤2，取步骤1得到的供试品溶液采用UHPLC-QQQ-MS动态MRM模式进行分析，得到贝母类药材的特征图谱，其中：

色谱条件为：色谱柱为Waters CORTECS T3 UPLC柱，150mm×2.1mm，1.6μm；流动相为含10mM甲酸铵的0.1％甲酸溶液A和乙腈B；流速0.2mL/min；柱温30℃；进样体积为2μL；洗脱条件：0～8min，15％→25％B；8～30min，25％→30％B；30～35min，30％→50％B；35～38min，50％→100％B；38～40min，100％B；40～41min，100％→15％B；41～45min，15％B；

质谱条件：毛细管电压为3.5kV；载气压力为35psig；干燥气温度为350℃；干燥气流速为8L/min；鞘气温度为350℃；鞘气流速为11L/min；喷嘴电压为1000V；

UHPLC-QQQ-MS动态MRM模式参数如下：

(1)川贝母特征图谱的动态MRM参数

(2)平贝母特征图谱的动态MRM参数

(3)浙贝母特征图谱的动态MRM参数

(4)伊贝母特征图谱的动态MRM参数

(5)湖北贝母特征图谱的动态MRM参数

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤1中每0.5g药材粉末，加入3mL25％的氨溶液碱化1h，再加入50mL二氯甲烷-甲醇混合溶液进行超声处理，二氯甲烷-甲醇混合溶液中二氯甲烷和甲醇的体积比为4：1。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤1中碱化时间为1h，超声处理时间为1h。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤2中，对于川贝母药材，供试品溶液50μL加入10μL 80μg/mL客西茄碱溶液后再进行分析；对于浙贝母药材，供试品溶液50μL加入10μL 24μg/mL客西茄碱溶液后再进行分析。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤2中：

对于川贝母类药材，所述特征图谱包括3个特征峰，其中，3号峰客西茄碱为参照峰，获得相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的±5％之内，所述规定值为峰1：0.57、峰2：0.62、峰S：1.00；

对于平贝母类药材，所述特征图谱包括3个特征峰，其中，3号峰贝母素乙为参照峰，获得相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的±5％之内，所述规定值为峰1：0.79、峰2：0.82、峰S：1.00；

对于浙贝母类药材，所述特征图谱包括2个特征峰，其中，1号峰客西茄碱为参照峰，获得相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的±5％之内，所述规定值为峰1：1.00、峰2：1.07；

对于伊贝母类药材，所述特征图谱包括3个特征峰，其中，1号峰伊贝辛为参照峰，获得相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的±5％之内，所述规定值为峰1：1.00、峰2：1.23、峰3：1.35；

对于湖北贝母类药材，所述特征图谱包括3个特征峰，其中，3号峰蒲贝素为参照峰，获得相对保留时间，所述相对保留时间应在规定值的±5％之内，所述规定值为峰1：0.68、峰2：0.73、峰S：1.00。

6.权利要求1至5任一项所述的方法构建得到的特征图谱。

7.权利要求6所述的特征图谱在鉴定贝母类药材中的应用。