[发明专利]实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物、探针及应用

权利要求书

1.用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如下：

SEQ ID NO.1：5'-CTACCCTTATCGGTGGATCACTA-3'，

SEQ ID NO.2：5'-AATGACCCTGAACCAGACGTT-3'；

所述探针的核苷酸序列如下：

SEQ ID NO.3：5'-AGTTTGACCTCAATGCGGCCATTTGCGT-3'。

2.根据权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针，其特征在于，所述探针的5’端标记荧光基团，所述探针的3’端标记淬灭基团。

3.根据权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针，其特征在于，所述探针的5’端标记荧光素FAM基团，所述探针的3’端标记TAMAR淬灭基团。

4.权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针的应用。

5.权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针在检测南方根结线虫方面的应用。

6.检测南方根结线虫的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针。

7.权利要求6所述的检测南方根结线虫的试剂盒的应用。

8.实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的方法，其特征在于，所述方法包括利用权利要求1所述的用于实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的引物和探针对南方根结线虫的DNA进行PCR扩增的步骤。

9.根据权利要求8所述的实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的方法，其特征在于，所述PCR反应体系包括以下组分：rTaq 0.5μL、MgCl₂ 3μL、10x PCR Buffer 2.5μL、dNTPs 2μL、探针1μL、引物2μL、0.1％BSA 5μL、H₂O 4μL、模板5μL。

10.根据权利要求8所述的实时荧光定量PCR检测南方根结线虫的方法，其特征在于，所述PCR扩增程序为：95℃30s；94℃5s；60℃30s，45个循环。