[发明专利]珊瑚共生链霉菌、发酵生产放线菌素D的方法及应用在审
| 申请号： | 202110811350.6 | 申请日： | 2021-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN113528388A | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 黄小龙;周双清;黄东益;李芬发;谢宇辉;吴彩燕 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P21/04;C07K7/06;A61K38/08;A61P31/04;C12R1/465 |
| 代理公司： | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人： | 张耀婷 |
| 地址： | 570228 海*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 珊瑚 共生 霉菌 发酵 生产 放线菌素 方法 应用 | ||
1.一种珊瑚共生链霉菌，其特征在于：该珊瑚共生链霉菌为链霉菌(Streptomyces sp)HNM0560，于2019年11月22日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏编号CCTCC M2019966。
2.一种权利要求1所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、培养HNM0560种子液；
S2、将培养获得的HNM0560的种子液接种至发酵培养基中发酵培养，获得发酵液；
S3、从发酵液中分离放线菌素D。
3.根据权利要求2所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于：步骤S2中，所述发酵培养基包括可溶性淀粉、酵母浸粉、蛋白胨、自来水、海水，pH 7.0。
4.根据权利要求3所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于：所述可溶性淀粉8～15g、酵母浸粉2～8g、蛋白胨1～5g、自来水400～600ml、海水400～600ml。
5.根据权利要求2所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于：步骤S2中，所述发酵条件为26～30℃、150～180rpm、5～7天。
6.根据权利要求5所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于：所述发酵条件为28℃、180rpm、7天。
7.根据权利要求2所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于，还包括以下步骤：
S3-1、将所述发酵液过滤，获得菌体；
S3-2、将菌体用丙酮浸提，减压蒸干，获得放线菌素D粗浸膏；
S3-3、将放线菌素D粗浸膏经LH-20凝胶柱色谱分离，得到放线菌素D。
8.根据权利要求2或7所述的珊瑚共生链霉菌发酵生产放线菌素D的方法，其特征在于：所述放线菌素D最高产量达到58mg/L。
9.一种权利要求2所述的放线菌素D在防治罗非鱼无乳链球菌中的应用。
10.根据权利要求9所述的放线菌素D在防治罗非鱼无乳链球菌中的应用，其特征在于：防治罗非鱼无乳链球菌的最小抑菌浓度为0.25μg/ml。
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