[发明专利]一种非变性II型胶原蛋白的制备方法

说明书

本发明公开了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法和产品。以鸡胸软骨为原料，经选材、清洗、粉碎、酶解、干燥、粉碎、过筛等步骤，得到吸水倍数为10‑13倍，体积膨胀倍数为5‑7倍，保留了非变性II型胶原蛋白天然长链结构且含量不低于15%。通过本发明制备的含非变性II型胶原蛋白的产品在提高了非变性II型胶原蛋白含量、吸水性和体积膨胀系数的前提下，具备提取过程快速、产品溶液悬浮性能好的优点，具有良好的市场应用前景。

技术领域

本发明公开的是一种从动物软骨中提取胶原蛋白的方法，涉及食品生物技术领域，尤其涉及一种非变性II型胶原蛋白的制备方法。

背景技术

胶原蛋白是一种广泛分布于哺乳动物体内的结构性蛋白，是构成皮肤、骨骼和关节等组织的重要组成部分，同时也是多细胞动物细胞外基质的主要成分之一。目前已知的胶原蛋白种类已有二十余种，根据组织分类可分为间隙胶原蛋白、基膜胶原蛋白和软骨胶原蛋白三大类，其中II型胶原蛋白主要分布于关节软骨中，少量存在于玻璃体、胚胎角膜等部位。

II型胶原蛋白是由三股缠绕的多肽链组成，由于其具备稳定的三螺旋结构，因此，在体内主要起到支撑器官、保护机体的作用。近年来的研究表明，II型胶原蛋白因其可作为关节的结构和功能性营养素，具有低免疫原性和生物相容性好等特点^[1]，受到消费者的广泛关注。

目前市售的II型胶原蛋白产品，多为完全酶解的胶原蛋白产品。由于提取工艺和制剂工艺的局限，在酶、高温等因素作用下，II型胶原蛋白丧失原有的三螺旋结构，胶原蛋白被分解为20,000道尔顿以下的多肽和氨基酸，失去原有对类风湿关节炎和关节炎的预防及辅助治疗功能^[2]。

目前，国内外已公开多种非变性II型胶原蛋白的制备工艺，例如CN106916870A公开的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法，通过脱脂、消毒、匀浆、酶解、过滤、干燥等步骤；其中，在所述酶解步骤中：将在匀浆步骤中获得的浆状物的pH调节为2.5～8.5，加入软骨重量的0.001％～2％的酶，加入软骨重量的1/20～1/500的木瓜和/或菠萝低温榨汁后过滤获得的清液，酶解12～48h。李洁，朱大开和龚辉（李洁, 朱大开, 龚辉. 非变性Ⅱ型胶原蛋白生产方法.），采用胃蛋白酶先对软骨除杂24h，再进行酶解提取24h得到可溶性非变性II型胶原蛋白。US7083820公开的一种生物活性产品的生产方法，鸡胸骨通过清洗、消毒、切碎、混合（无机盐）、干燥等步骤，其中上述所述步骤是在110℉以下操作，得到不改变生物活性产品原始结构的II型胶原蛋白。

但已公开的技术方法及制备的非变性II型胶原蛋白依然存在问题：一产品在溶液中悬浮性能差，易分层；二是产品制备提取经过蛋白酶或酶提取原料进行长时间的充分水解，非变性II胶原蛋白含量较低，且提取时间长，不利于工业生产推广。

发明内容

本发明提供了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法，旨在解决上述问题中的一个或多个问题。

具体技术方案如下：

本发明提供了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法，它的特征是依次包括以下步骤：

（1）选材：所选原料为新鲜鸡胸软骨，手工剔除脂肪和肌肉后，切取距离鸡胸软骨尖端3厘米以内部分备用；

（2）清洗：使用温度不高于37℃的清水清洗步骤（1）中切取备用的软骨；

（3）粉碎：将步骤（2）中经清洗的软骨沥干后，使用粉碎机将软骨粉碎为2 mm以下的软骨颗粒；

（4）酶解：向步骤（3）所得软骨颗粒中加水，加水量为软骨颗粒质量的0.5~3倍（m/V），使用酸液或碱液调节料液pH值在2.0~4.0之间，加入软骨颗粒重量1.0~5.0%的胃蛋白酶，酶解温度不超过37℃，搅拌并酶解0.5~2.0 h；酶解结束后，使用碱液调节pH值至8.5~9.5，静置15~60 min；