[发明专利]合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液、制备方法及使用方法在审
申请号: | 202110816517.8 | 申请日: | 2021-07-20 |
公开(公告)号: | CN113583936A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 方伟;陈明强;李有宁;王雨;邓正华;魏海军;于刚 | 申请(专利权)人: | 三亚热带水产研究院;中国水产科学研究院南海水产研究所 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07 |
代理公司: | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人: | 张耀婷 |
地址: | 572000 海南省三亚市崖*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合浦 珠母 外套膜 细胞 体外 培养液 制备 方法 使用方法 | ||
1.一种合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液,其特征在于,包括以下组分:基础细胞培养基、茶多酚、胎牛血清、珍珠贝体液、卡那霉素、平衡盐溶液、葡萄糖。
2.根据权利要求1所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液,其特征在于,各组分添加量分别为:
基础细胞培养基200~300ml/L、茶多酚1.5~2.0ml/L、胎牛血清2.5~4.0ml/L、珍珠贝体液2.0~3.0ml/L、卡那霉素0.05~0.08g/L、平衡盐溶液200~350ml/L、葡萄糖100~200ml/L。
3.根据权利要求1或2所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液,其特征在于:所述基础细胞培养基采用TC199细胞培养基。
4.根据权利要求3所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液,其特征在于,所述珍珠贝体液的获取方法:将生长状况良好的合浦珠母贝外壳清洗干净并擦拭75%酒精,放置阴凉处,待酒精挥发后,在无菌操作台内打开外壳获取初始珍珠贝体液,将初始珍珠贝体液、0.5ppm的高锰酸钾溶液和无菌蒸馏水混合,得到珍珠贝体液。
5.根据权利要求4所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液,其特征在于:所述初始珍珠贝体液、0.5ppm的高锰酸钾溶液和无菌蒸馏水按照体积比5:2:10的比例混合。
6.一种权利要求5所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液的制备方法,其特征在于:将基础细胞培养基、茶多酚、胎牛血清、珍珠贝体液、卡那霉素、平衡盐溶液和葡萄糖经紫外灯消毒,在无菌操作室内混匀,得到合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液。
7.一种权利要求6所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液的使用方法,其特征在于:将合浦珠母贝外套膜细胞放入所述合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液内,在无菌的环境下,放在恒温箱内保持27.0±0.5摄氏度进行体外培养。
8.根据权利要求7所述的合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液的使用方法,其特征在于:保持27摄氏度进行体外培养。
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