[发明专利]一种银鲳肌肉组织细胞系在审

专利信息
申请号: 202110818896.4 申请日: 2021-07-20
公开(公告)号: CN113637632A 公开(公告)日: 2021-11-12
发明(设计)人: 张友仪;王亚军;胡佳宝;张曼;李亚亚;孙嘉初;蒋欢;王冠林;朱家杰;王想兵 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;C12R1/91
代理公司: 北京识然知识产权代理事务所(普通合伙) 11975 代理人: 曾庆国
地址: 315000 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 肌肉 组织 细胞系
【权利要求书】:

1.一种银鲳肌肉组织细胞系,其特征在于,所述的细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2021154。

2.如权利要求1所述的细胞系,其特征在于,所述的细胞系是从银鲳幼鱼肌肉组织细胞构建的。

3.如权利要求1所述的细胞系,其特征在于,所述的细胞系的建立方法如下:

1)银鲳肌肉组织的获取:

取6月龄的银鲳幼鱼的肌肉组织,用包含有青霉素和链霉素的D-hanks溶液漂洗后,移入基础培养基中;

2)原代培养:

将银鲳肌肉组织剪碎至1mm3大小的组织块,用胰蛋白酶消化,再加入完全培养基终止消化,用完全培养基重悬沉淀的细胞团,并加入组织块在后26℃培养箱中培养;

3)传代培养:原代培养至贴壁细胞增殖至70-80%覆盖率时,移除旧培养基,并用含青霉素-链霉素双抗的D-hanks溶液清洗除去多余的血清和二价金属离子;然后用0.25%胰蛋白酶消化贴壁细胞,再进行传代培养获得银鲳肌肉组织细胞系。

4.如权利要求3所述的细胞系,其特征在于,所述的完全培养液为以Leibovitz’s L15为基础,包括终浓度分别为20%胎牛血清FBS,5‰β-巯基乙醇、50μg/mlN-乙酰葡糖胺、50μg/ml羧甲基纤维素钠、10μg/l人FGF-basic、5μg/l人EGF、10μg/l人GH、5μg/l人HGF、100IU/ml青霉素以及100μg/ml链霉素。

5.权利要求1所述的细胞系的传代培养方法,其特征在于,所述的方法是使用添加20%FBS的完全培养基进行传代培养。

6.权利要求1所述的细胞系在营养代谢、功能基因研究和育种研究中的应用。

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